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由于实验需求不同,使用的实验用水等级也不同,今天给大家介绍一下实验室用水的标准。在此之前我们先看一下评价水的常用指标。 一.评价水质的指标

1、电阻率(electrical resistivity):

衡量实验室用水导电性能的指标,单位为MΩ cm,随着水内无机离子的减少电阻加大则数值逐渐变大,实验室超纯水的标准:电阻率为18.2MΩ cm。 2、总有机碳(Total Organic Carbon , TOC):

水中碳的的浓度,反映水中氧化的有机化合物的含量,单位为ppm 或 ppb。 3、内毒素(Endotoxin):

革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片,又称之为“热原”,单位cuf/ml。 二.各类水比较

1、蒸馏水:

实验室最常用的一种纯水,虽设备便宜,但极其耗能和费水且速度慢,应用会逐渐减少。蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物,但挥发性的杂质无法去除,如二氧化碳、氨、二氧化硅以及一些有机物。新鲜的蒸馏水是无菌的,但储存后细菌易繁殖;此外,储存的容器也很讲究,若是非惰性的物质,离子和容器的塑形物质会析出造成二次污染。 2、去离子水:

应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子,但水中仍然存在可溶性的有机物,可以污染离子交换柱从而降低其功效,去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。

去离子水的电导率通常在1.0 - 0.1 μS/cm之间(电阻率在1.0 - 10.0 M?-cm)。它通过采用含强阴离子交换树脂的混床离子交换制成,有相对较高的有机物和细菌污染水平,能满足多种需求,如清洗、配置分析标准样、制备试剂和稀释样品。 3、反渗水:

其生成的原理是水分子在压力的作用下,通过反渗透膜成为纯水,水中的杂质被反渗透膜截留排出。反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点,利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体,细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质,但不同厂家生产的反渗透膜对反渗水的质量影响很大。

4、纯水:

纯水的纯化水平最低,通常电导率在1-50 μS/cm之间。它可经由单一弱碱性阴离子交换树脂、反渗透或单次蒸馏制成。典型的纯水应用包括玻璃器皿的清洗和清洗机用水。 5、实验室纯水

通常实验室纯水不仅要求在离子指标上有较高纯度,而且要求低浓度有机物和微生物。典型的指标是电导率<1.0 μS/cm(电阻率 >1.0 M?-cm),总有机碳(TOC) 含量小于50 ppb 以及细菌含量低于1CFU/ml。其水质可适用于多种需求,从试剂制备和溶液稀释,到为细胞培养配备营养液和微生物研究。实验室纯水可双蒸而成,或整合RO和离子交换/ EDI多种技术制成,也可以再结合吸附介质和UV

灯。

6、超纯水(Ultra-pure grade water):

其标准是水电阻率为18.2MΩ cm。但超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同,要根据实验的要求来确定,如细胞培养则对细菌和内毒素有要求,而HPLC则要求TOC低。

超纯水在电阻率、有机物含量、颗粒和细菌含量方面接近理论上的纯度极限,通过离子交换、RO膜或蒸馏手段预纯化,再经过核子级离子交换精纯化得到超纯水

其标准是水电阻率为18.2MΩ cm。但超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同,要根据实验的要求来确定,如细胞培养则对细菌和内毒素有要求,而HPLC则要求TOC低。

超纯水在电阻率、有机物含量、颗粒和细菌含量方面接近理论上的纯度极限,通过离子交换、RO膜或蒸馏手段预纯化,再经过核子级离子交换精纯化得到超纯水。

三.水的纯化技术

微孔深层过滤

?对颗粒的通过设置了物理屏障,并根据过滤微细颗粒的大小分级,由缠绕纤维或压紧的物质形成多孔矩阵,通过吸附或捕捉方式截留颗粒。深层过滤器(一般为1-50μm)通常作为一种经济的纯化方式用于截留大量的悬浮固体,并保护下游的纯化设备不被污染和堵塞。它们需要定期更换。

活性碳吸附

?活性碳通常用于预处理系统以去除进水中的氯和氯胺,防止它们破坏过滤膜和离子交换树脂。

?大部分活性碳是由椰壳或煤在有水蒸气和CO2的条件下,经800-1000℃ 煅烧而形成具活性的木炭,经过酸洗去掉残余氧化物和其他溶解物质。用于水处理的活性碳通常孔径范围在500-1000nm之间,每克比表面积大约1000m2,通常是颗粒状压缩成型的,并装填于纯化柱中以防止产生太过微细颗粒污染下游。 ?活性碳的巨大表面和海量微孔以及吸附的物质,成为微生物的繁殖地。微生物的生长可以通过添加非溶解性生物杀灭剂到碳中,如银,得到部分抑制。活性碳柱需要定期更换以保持最少的细菌含量。

反渗透(RO)

?反渗透膜通常用于滤除直径小于1nm的污染物,典型的反渗透方式可以滤掉水中90%的离子污染物,大部分有机物和几乎全部微粒污染物。反渗透对分

子量<100道尔顿的非离子污染物的去除能力较低,而随污染物分子量的增大,RO膜的滤除能力也随之增强。理论上说,这种方式可以100%滤除>300道尔顿分子量的分子和包括胶体及微生物在内的颗粒,溶解的气体则无法靠RO膜去除。

?由于其出色的纯化功效,反渗透是一项对去除绝大部分杂质非常具成本效益的技术。不过,其产水速度相对较低,所以使用时通常配以储水箱暂存产成水以备使用或进一步纯化。反渗透装置保护后续系统免收胶体和有机物的堵塞或污染,其后续系统通常配备离子交换或电渗析装置。

离子交换

?离子交换树脂床能通过与H+和OH-的离子交换,从水中有效去除离子。离子交换树脂是直径小于1mm的多孔小球,由交链的含有大量功能强大的离子交换点的不溶性聚合物制成。水中的离子依据它们的相对电荷密度竞争离子交换树脂的交换点而被树脂吸附。树脂分为阳离子树脂和阴离子树脂两种。

?离子交换树脂床放在小型滤柱或大型滤筒中使用,一般使用一段时间后就要更换,此时阴阳离子交换基团已经替换了树脂中大部分H+和OH-的活性点。通过将RO膜设置在离子交换之前的方式,可得到更纯的水质并延长填料的使用寿命,该方法经常用于生产高纯度超纯水的实验室纯水系统中。这种方法也可避免离子交换树脂表面被大的有机物分子堵塞,从而降低其交换能力。

电渗析

?电渗析(EDI)是一项结合了离子交换树脂和离子选择性通透膜,并结合直流电去除水中离子化杂质的技术。该项技术的发展克服了离子交换树脂的局限性,特别是离子交换柱耗竭时离子杂质的释放及重填或再生离子交换柱的工作。 ?水通过一个或多个在阳离子或阴离子选择膜之间填满离子交换树脂的管腔,在电场的作用下,离子在离子交换树脂间向管腔的两侧移动并进入另外的管腔,这个过程中也会电解产生维持树脂处于再生状态所需的H+和OH-流向两侧独立管腔的离子被水冲刷掉。

?通常,EDI的产成水电阻率可达到5-17

MΩ-cm(在25℃时),总有机碳含量(TOC)低于20ppb。由于系统内化学和电环境的作用抑制微生物生长,使细菌水平达到最小化。一般来说,EDI不能产生电阻率18.2

MΩ-cm的超纯水。必须在EDI之后放置离子交换柱才可生产18.2

MΩ-cm的超纯水,并且因为水中只有极少数量的离子存在,所以延长了离子交换柱的使用寿命。

蒸馏

?蒸馏法是通过改变水的形态——从液态到气态再回到液态,将水和污染物分离。每一个转换过程都为纯水与污染物的分离提供了机会。理论上,除蒸汽压力与水接近的物质和共沸化合物,蒸馏法能去除所有种类的水中污染物。 ?像RO一样,蒸馏法生产纯水的速度较慢,所以蒸馏水必须先储存起来以备日后使用。

?蒸馏水器非常耗电——每生产1升纯水通常耗费1KW电力。依据蒸馏水器的不同设计,蒸馏水的电阻率大约能达到1

MΩ-cm,因为空气中的CO2会溶入蒸馏水中迅速降低其电导率。新鲜蒸馏水是无菌的,但如果保存不当,一段时间后就不再是无菌的了。 微滤

?纯水系统中的微滤器对水中颗粒物和微生物进行物理性阻截。膜滤器完全根据颗粒的大小分级,有较一致的分子结构,截留所有大于其表面孔径的颗粒。 ?膜滤器(0.05-0.20μm)通常被放置在尽可能接近出水点的地方来捕获微生物和微细颗粒。

?所截留的颗粒物包括微生物或其代谢物和可溶性物质,可能再次从滤器中沥滤出来,所以对微滤器的适当维护(定期消毒和周期性更换)是必要的,使其性能保持在理想水平。新安装的滤器通常要求在使用前冲洗以去除可能含有的可萃取污染物。

超滤

?超滤(UF)是一个过滤术语,指能去除如蛋白质大小的颗粒的过滤器。膜孔径通常在1-50nm之间,中空纤维结构的超滤膜通常有较高的滤过速率。超滤膜根据其降低相关污染物浓度的效率来分级。

?超滤膜通常安装在靠近纯水仪出水口的位置以降低微生物和有机大分子,包括核酸酶和内毒素的浓度。超滤必须定期清洗或更换以保持其效能。超滤可以以传统的方式安装,所有水流径直穿透滤膜,或者以更佳的方式——切向流方式,一部分进水平行流过膜表面带走污染物以减少其对膜表面的堵塞。

?对于保障超纯水在颗粒、细菌和热源含量等各项指标上保持稳定的高质量,超滤法是一项出色的技术。国际上通行的用于超纯水仪的超滤膜截留分子量是5000道尔顿。

紫外灯

?紫外灯通常作为杀菌装置分解和光氧化有机污染物使其极化或离子化,一般安装在离子交换柱之前,便于离子交换柱将其吸附去除。实验室纯水系统的紫外灯光源为低压汞灯。

?254nm波长的射线具备最强的杀菌能力,能破坏DNA和RNA聚合酶,只需低量就可有效阻止细菌的复制,较高剂量时有杀菌作用。UV灯组件和UV灯本身的设计应提供足够的UV剂量以避免活菌的滋生并抑制微生物生长。 ?较短波长(185nm)的射线对有机物有非常好的氧化作用。UV将大的有机分子裂变为较小的离子化合物,并被后置的离子交换柱纯化去除。通过第一个离子交换柱对有机离子的去除,优化了UV的效能。 ?先进的超纯水系统都会使用这种双波长的紫外灯组件。 实验室用水等级 名称 pH范围(25℃) 电导率(25℃),ms/m ≤ 比电阻(25℃,MΩ,cm) ≥ 可氧化物质(以O计)mg/L < 吸光度(254nm,1cm光程) ≤ 蒸发残渣(105±25℃),mg/L ≤ 可溶性硅(以SiO2计),mg/L < 一级 --- 0.01 10 --- 0.001 --- 0.01 二级 --- 0.10 三级 5.0-7.5 0.50 1 0.08 0.01 1.0 0.02 0.2 0.40 --- 2.0 --- 一级水用于有严格要求的分析实验,如液相色谱分析用水等。 二级水用于无机痕量分析,如原子吸收光谱分析用水等。 三级水用于一般化学分析实验。

中国国家实验室用水标准(GB6682-2000)的补充说明:由于在一级和二级水的纯度下,难于测定其真实的pH值,因此对一级和二级水的pH值范围国标不作规定。

一级和二级水的电导率需用新制备的水在线测定。

由于在一级水的纯度下,难于测定可氧化物和蒸发残渣,故国标对其限量也不作规定,可用其他条件和制备方法来保证一级水的质量。

国标对一、二级水电导的测试方法有明确的规定:用于一、二水测定的电导仪,需配备电极常数为0.01—0.1cm-1的在线电导池,并具有温度自动补赏功能。