发布时间 : 星期日 文章细胞生物学研究中的激活剂和抑制剂更新完毕开始阅读13ac1a04e518964bcf847c92
酶。活化的Rho GTP酶会与丝氨酸/苏氨酸激酶、Rho激酶、ROK及相关的p160ROCK等激酶结合并提高它们的活性。活化的Rho-激酶会抑制肌球蛋白磷酸酶的活性，从而促使肌球蛋白轻链（MLC）磷酸化。
PLC、 Ca2+和PKC的作用 [168]：收缩过程始于磷脂酶C（PLC）活化，从而产生两种第二信使，甘油二酯（DG）和肌醇1,4,5-三磷酸（IP3）。IP3会导致Ca2+从肌质网中释放出来。Ca2+会以两种方式来诱导收缩：1）Ca2+与DG一起激活蛋白激酶C。PKC则通过使L型Ca2+通道和其它调控横桥周期的蛋白发生磷酸化来进一步促进收缩，2）Ca2+与钙调蛋白结合并活化肌球蛋白轻链激酶（MLCK）。
现在用于研究细胞收缩途径的各种抑制剂和激活剂包括：
抑制剂 靶点 机制 作用特点及效果 溶于DMSO和甲醇。也抑抑制肌球蛋肌球蛋白轻链激酶星孢菌素（C28H26N4O3） （MLCK）、蛋白激酶C（PKC） 白轻链激酶1.3 nM）、蛋白激酶C700 pM） 制蛋白激酶A（IC50 = 7 激酶G（IC50 = 8.5 nM）。的细胞周期阻滞于G1期检查点。 在水中可溶达14 mg/ml。抑制激动剂诱导Rho关联蛋白激酶的可逆选择性抑制（p160Y-27632（C14H21N3O · 2HCl） ROCK 剂ROCK参考文献、来源及供应商 [169][170][171], Sigma-Aldrich, EMD4Biosciences, Bioscience, Sciences Enzo Cell （IC50 = nM）和蛋白signaling Technology Inc., Tocris Life （IC50 = 将正常细胞的肌球蛋白磷酸化和平滑肌收缩的Ca致敏。同样抑制蛋白[172][173][174][175], Sigma-Aldrich, Tocris Bioscience, Stemgent. 2+的Ki = 140 激酶C相关nM)。同样抑制ROCK-II。这种抑制对于ATP是竞争性的。 600 nM）。已经被发现会阻止凋亡并增加解离的人胚胎干细胞的存活率及克隆效率而不影响其多能性 激酶（IC50 = EMD4Biosciences, 在水中溶达100 mM，在DMSO中溶达50 mM in DMSO。比Y-27632的选择性的H-1152（C16H21N3O2S.2HCl） ATP竞争性ROCK rho激酶（ROCK）抑制剂 效力及选择性更强。对于其它丝氨酸/苏氨酸激酶的亲和性较弱（PKA的Ki=630nM，PKC的为9.27m而MLCK的为10.1mM）。 在DMSO中溶达25 mM。抑制PKA（Ki = 32 μM）。 [180][181][182], 浓度为Bioscience, Chemical, EMD4Biosciences 10-100 μM时抑制血管平滑肌张力并降低胞内Ca浓度。 溶于DMSO或50%乙醇。在较高浓度肌球蛋白轻ML-7（C15H17IN2O2S · HCl） 肌球蛋白轻链激酶（MLCK） 链激酶的ATP竞争性选择抑制剂（Ki = 300 nM） 时抑制蛋白激酶A（Ki = [183][180][184], 21 μM）和蛋= 42 μM）。ML-9的衍生物。与ML-9相比是更加强劲的抑制剂。 K-252a（C27H21N3O5） MLCK、PKC 抑制PKC溶于DMF或[185][186][187][188], LC Sigma-Aldrich, Santa Biotechnology, EMD4Biosciences Tocris Cruz 白激酶C（Ki Bioscience, 2+[176][177][178][179], Tocris Bioscience, Sciences, Enzo Life Sigma-Aldrich, Santa Cruz Biotechnology, 肌球蛋白轻链肌球蛋白轻ML-9（C15H17N2O2SCl · HCl） 链激酶（MLCK）、蛋白激酶C（PKC） 激酶（MLCK）（Ki = 4 μM）和PKC（Ki = 54 μM）的选择性抑制剂 Tocris Cayman Sigma-Aldrich, （IC50 = DMSO。星孢32.9 nM）和20 nM）。作为ATP竞争性抑制剂同样抑制MLCK（Ki = 阻止下游效应蛋白（MAPK、Akt）的自磷酸化与活化。Cdc2和Laboratories, Tocris 菌素类似物。Bioscience, EMD4Biosciences/Millipore, Invitrogen, Sigma-Aldrich PKA、PKG、通过抑制CaMK、磷酸化酶激酶、MAP激酶和受体酪氨酸激酶的trk家族。 吩噻嗪类抗钙调蛋白拮抗剂。抑制三氟拉嗪 钙调蛋白 Ca/钙调蛋白依赖性的磷酸二酯酶。 2+Cdc25来引起凋亡和细胞周期阻滞。 精神病D2多巴胺受体拮抗剂，抑制门控阳离子通道（IC50 = 13 μM）并抑制肝鸟氨酸脱羧酶活性。 [189]Sigma-Aldrich, EMD4Biosciences 抑制Ca/钙调蛋白活化的磷酸二W-7（C16H21ClN2O2S · HCl） 钙调蛋白 酯酶（IC50 = 抑制仓鼠卵28 μM）和肌球蛋白轻链激酶（IC50 = 51 μM）。 巢K1细胞增殖 [190][191][192], Sigma-Aldrich, EMD4Biosciences, Cruz Biotechnology Santa 2+表11.常用的细胞收缩抑制剂。
激活剂 靶点 机制 有效的血管作用特点及效果 在1%乙酸和水中溶解度 >1mg/ml。诱导缺氧诱导因子1α及VEGF的产生。在表达ETA受体的成纤维参考文献、来源及供应商 内皮素IMLC磷酸化 收缩剂。 内皮素I通过激活Rho激酶途径以及之[193][194][195][196], Sigma-Aldrich, EMD4Biosciences, Fisher （C109H159N25O32S5） 后的MLC磷酸化来调节收缩 细胞中激活PLC。 激活RhoA、Rho Calpeptin（C20H30N2O4） GTP酶 B和C。RhoA的激活可能是由于抑制了肌球蛋白轻链磷酸化。 溶于DMSO和DMF。它是钙蛋白酶这种Ca依赖性的蛋白酶的抑制剂，组织蛋白酶L的有效抑制剂并且优先抑制膜相关酪氨酸磷酸酶活性。 光敏的。溶于DMSO2+[197][198], Cytoskeleton Inc., Santa Cruz Tocris Biotechnology, Bioscience, EMD4Biosciences 佛波醇 12-十四酸酯-13-乙酸酯（PMA）(C36H56O8） 蛋白激酶C 和乙醇。甚至在nM与PKC可逆结合 浓度时就能在体外和体内激活PKC。它也是强力的肿瘤诱发物。 在乙醇中100%可容。[199][200][201], Sigma-Aldrich, EMD4Biosciences 蛋白密执毒素（C38H38O10） 激酶C 在nM浓度时活化蛋白激酶。 肿瘤诱发物。诱导白细胞介素1α，与植物血凝素一起诱导干扰素。 溶于甲醇（63 [202][203], Sigma-Aldrich, Santa Cruz Biotechnology L型Ca通BAY K 8644Ca2+2+mg/ml）、乙醇（63 mg/ml）和DMSO（20 促进β-细胞增殖与再生。 光敏的。溶于水、DMSO、丙酮、乙醇。由于相对不疏水，比[204][205][206]Tocris Bioscience, Sigma-Aldrich, Cruz EMD4Biosciences Santa Biotechnology, 道激活剂（EC50 17.3 nM） （C16H15F3N2O4） 通道 = mg/ml）。抑制自噬。12,13-二丁酸佛波醇（PDBu）（C28H40O8） 蛋白激酶C 活化蛋白激酶C PMA更容易从组织培养中的细胞内清洗出来。引起Na,K-ATP酶的磷酸化。也会促使生成一氧化氮。 ++[177][207][208], Sigma-Aldrich, EMD4Biosciences 表12.细胞收缩的常用激活剂。
细胞粘附（细胞-细胞间粘附和细胞与微环境间的粘附）
细胞粘附：细胞利用细胞粘附分子与胞外基质、其它细胞或细胞培养物的表面发生相互作