发布时间 : 星期四 文章2019-2020学年生物人教版选修1同步检测：专题5.课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含解析更新完毕开始阅读23e6e461f424ccbff121dd36a32d7375a517c697
课题3 血红蛋白的提取和分离
理一理
判一判
1.凝胶色谱法和电泳法分别利用了蛋白质的相对分子质量的大小和所带电荷性质的不同，实现了对蛋白质的分离。(√)
2．相对分子质量大的蛋白质会被排阻在凝胶颗粒之外而不能通过凝胶。(×)
3．缓冲溶液可以抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响。(√) 4．电泳过程中蛋白质的运动速率只与带电性质有关。(×) 5．测定蛋白质相对分子质量时常用琼脂糖凝胶电泳。(×) 6．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率仅与其电荷多少有关。(×)
7．添加了SDS后的蛋白质电泳结果只跟蛋白质的分子量有关。(√)
8．血红蛋白存在于血浆中，是内环境的组成部分。(×) 9．洗涤红细胞和血红蛋白的释放所用的液体分别是生理盐水和蒸馏水。(√)
10．装填色谱柱时要先把凝胶物质填充进去，而后立即用高压缓冲液洗涤以使凝胶紧密。(√)
悟一悟
1.在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，影响分离效果。
2．在凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象。
一旦发生上述两种情况，凝胶色谱柱需要重新装填。 3．小心加入磷酸缓冲液到适当高度后，再连接缓冲液洗脱瓶，
打开下端出口，进行洗脱，不能边加缓冲液边洗脱，这样会扰乱洗脱顺序。
4．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，再用试管收集流出液．此时收集到的才是纯度较高的血红蛋白溶液。收集时间不要过早或过晚，若收集时间过早，血红蛋白还未洗脱出，若收集时间过晚，则血红蛋白早已经洗脱出，得不到血红蛋白。
感悟体会： 练一练
1.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示。下列叙述正确的是( )
A．将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子甲也一定存在于沉淀中
B．若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快
C．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子甲也保留在袋内
D．若五种物质为蛋白质，用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远
解析：分子戊分子量大于甲，以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子甲不存在于沉淀中，A项错误。丙的分子量最大，用凝胶色谱柱分离时，丙的移动速度最快，B项错误。透析12 h，由于甲分子量较小，若分子乙保留在袋内，则分子甲不保留在袋内，C项错误。分子甲和分子丙相差最大，移动速度相差最大，D项正确。
答案：D
2．已知蛋白质混合液中硫酸铵浓度的不同可以使不同种类的
蛋白质析出(或沉淀)，随着硫酸铵浓度增加，混合液中蛋白质析出的种类和总量增加。下表是某蛋白质混合液中的不同蛋白质从开始析出到完全析出所需要的蛋白质混合液中的硫酸铵浓度范围。 蛋白质混合液中的硫酸铵析出的蛋白质 浓度(%) 15～20 甲蛋白质 23～30 乙蛋白质 25～35 丙蛋白质 38～40 丁蛋白质 请据表回答： (1)若只完全析出甲蛋白，混合液中最合适的硫酸铵浓度应为________。
(2)向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使混合液中的硫酸铵浓度达到30%，会析出若干种蛋白质，它们分别是________________________。
(3)通过改变混合液中硫酸铵的浓度________(能、不能)从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白，原因是________________________________________________________________________。
(4)简要写出从该蛋白质混合液中分离出全部丁蛋白的实验设计思路。
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)如果蛋白质析出物中还含有一定量的硫酸铵，可用半透膜除去析出物中的硫酸铵。用半透膜能除去析出物中硫酸铵的原理是
________________________________________________________。
解析：(1)从析出到完全析出甲蛋白质所需要的硫酸铵浓度范围为15%～20%，故只完全析出甲蛋白时，混合液中的硫酸铵的浓度最好为20%。(2)从开始析出到完全析出乙的蛋白质混合液中
的硫酸铵浓度范围为23%～30%，从开始析出到完全析出丙蛋白混合液中的硫酸铵浓度范围为25%～35%，故混合液中的硫酸铵浓度达到30%时，可以同时析出乙蛋白和丙蛋白。(3)由于乙蛋白和丙蛋白析出所需的硫酸铵浓度范围有重叠，故通过改变混合液中硫酸铵的浓度不能从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白。(4)向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使其浓度达到35%(或35%≤硫酸铵溶液≤38%范围内任意一个浓度)，分离析出物与溶液，保留溶液。取保留溶液，再加入硫酸铵溶液(或加入硫酸铵)，使硫酸铵在溶液中的浓度达到40%(或40%以上)，分离析出物与溶液，析出物即为丁蛋白。(5)半透膜是一种选择透过性膜，只允许小分子的硫酸铵通过，不允许大分子蛋白质通过，故可以用半透膜除去析出物中的硫酸铵。
答案：(1)20% (2)甲蛋白、乙蛋白、丙蛋白 (3)不能 乙蛋白和丙蛋白析出所需的硫酸铵浓度范围有重叠 (4) 向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使其浓度达到35%(或35%≤硫酸铵溶液≤38%范围内任意一个浓度)，分离析出物与溶液，保留溶液。取保留溶液，再加入硫酸铵溶液(或加入硫酸铵)，使硫酸铵在溶液中的浓度达到40%(或40%以上)，分离析出物与溶液，析出物即为丁蛋白 (5)半透膜是一种选择透过性膜，只允许小分子的硫酸铵通过，不允许大分子蛋白质通过
考点1 实验原理
1.[2019·武汉市钢城第四中学高二期中]利用凝胶色谱法分离蛋白质时，蛋白质洗脱出来的顺序是( )
①相对分子质量最大的 ②相对分子质量最小的 ③相对分子质量适中的