发布时间 : 星期四 文章2019-2020学年生物人教版选修1同步检测：专题5.课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含解析更新完毕开始阅读23e6e461f424ccbff121dd36a32d7375a517c697
纯化血红蛋白时，应该用缓冲液进行洗脱，如果洗脱过程中红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功，分离效果较好；凝胶色谱法的基本原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，所以洗脱时，相对分子质量大的蛋白质比小分子先被洗脱出来。
答案：(1)柠檬酸钠 生理盐水 上清液不再呈现黄色 (2)蒸馏水和甲苯 透析 (3)缓冲液(洗脱) 均匀一致地移动 先 7．[2019·吉林白城一中高二期末]选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验可提取和分离血红蛋白。
(1)实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是________________________。
(2)在对样品进行处理时，主要包括________________________________________________________________________、
血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术的原理是________________________________________________________________________。
(3)利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离，基本原理是____________________(填“相对分子质量大”或“相对分子质量小”)的蛋白质，路程较短，移动速度较快。
解析：(1)加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)对样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤，透析的原理是小分子可以自由进出透析袋(半透膜)，而大分子不能通过，这样可以除去相对分子质量较小的杂质。(3) 利用凝胶色谱法进行血红蛋白分离的基本原理是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质。其中相对分子质量大的蛋白质，路程较短，移动速度较快，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢。
答案：(1)防止血液凝固 (2)红细胞的洗涤 小分子可以自由进出透析袋(半透膜)，而大分子不能通过 (3)相对分子质量大 8．[2019·新疆兵团农八师一四三团第一中学高二期中]红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：________、粗分离、纯化和________。
(2)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是______________________。
②以上所述的过程即是样品处理，它包括红细胞的洗涤、________________________、________________________________________。
(3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离，其方法是________________________________________________________________________。
(4)然后通过________________________将样品进一步纯化，最后经________________________进行纯度鉴定。
(5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及____________、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。
解析：(1)血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。(2)①采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固。②以上所述的过程即是样品处理，包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步。(3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离，其方法是透析，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白。(4)样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。(5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不
同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。
答案：(1)样品的处理 纯度鉴定 (2)①防止血液凝固
②血红蛋白释放 分离血红蛋白 (3)透析 (4)凝胶色谱法 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 (5)分子大小
9．[2019·江西南昌二中高二期末]请回答下列蛋白质的提取和分离实验相关问题：
(1)凝胶色谱法是根据________________分离蛋白质的有效方法。
(2)蛋白质的提取和分离实验中洗涤红细胞的目的________________________。
(3)重复洗涤三次，直至________________________，表明红细胞已洗涤干净。在该过程中离心速度过高和时间过长会导致______________________________。
(4)在凝胶色谱柱装填时不得有气泡存在，原因为气泡会________________________________。在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象，如果发生则________________________。
(5)在蛋白质的分离过程中如果观察到________________________________，说明色谱柱制作成功。
解析：(1)凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，分子量大的路径短、速度快。(2)蛋白质的提取和分离实验中，首先要用生理盐水洗涤红细胞，其目的是去除杂蛋白。(3)洗涤红细胞后有利于后续步骤的分离纯化，洗涤干净的标志是离心后的上清液不再呈现黄色；该实验的目的是分离白细胞，离心速度过高和时间过长会导致白细胞等一同沉淀，而达不到分离效果，使实验失败。(4)由于气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，所以在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡产生。在操作中不能发生洗脱液流干漏出凝胶颗粒的现象，如果发生则凝胶色谱柱需要重新装填。(5)在蛋白质分离过程中，如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。
答案：(1)相对分子质量的大小 (2)去除杂蛋白 (3)上清液不
再呈现黄色 白细胞等一同沉淀，达不到分离效果 (4)搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果
凝胶色谱柱需要重新装填 (5)红色区带均匀一致地移动 10．[2019·吉林长春市田家炳实验中学高二期末]如今人类已跨入了蛋白质时代，对蛋白质的研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题：
(1)装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡必须重新装。这是因为气泡会搅乱洗脱液中________，降低分离效果。
(2)如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请据图回答下列问题：
①甲装置用于________，其目的是________________________________。用乙装置分离蛋白质的方法叫________________，是根据________________分离蛋白质的有效方法。
②用乙装置分离血红蛋白时，待________________________接近色谱柱的底端时，用试管收集流出液，每5 mL收集一管，连续收集。
解析：(1)装填凝胶色谱柱时，若产生气泡，则气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，从而降低分离效果。(2) ①甲是透析装置，用于透析，其目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质，使大分子蛋白质保留在袋中。乙是利用凝胶色谱法分离蛋白质的装置，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。②由于血红蛋白带有红色，当红色的蛋白质接近色谱柱的底端时，用试管收集血红蛋白，每5 mL收集一管，连续收集。
答案：(1)蛋白质的洗脱次序 (2)①透析(粗分离) 去除样品中相对分子质量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小 ②红色的蛋白质接近色谱柱的底端