发布时间 : 星期四 文章2019-2020学年高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离学业分层测评新人教版更新完毕开始阅读2d40e3480875f46527d3240c844769eae109a32b
溶液分为四层，从上到下的顺序依次是( )
A．血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、红细胞破碎物沉淀层 B．甲苯层、红细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层 C．脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、红细胞破碎物沉淀层 D．甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、红细胞破碎物沉淀层
【解析】 混合液经离心后按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：第1层为无色透明的甲苯层，第2层白色薄层固体是脂溶性物质沉淀层，第3层红色透明液体是血红蛋白水溶液，第4层暗红色沉淀物主要是红细胞破碎物沉淀。
【答案】 D
12．如图是用除去DNA的滤液进行血红蛋白的提取和分离实验的装置，下列有关叙述不正确的是( )
A．首先用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质 B．图乙装置的试管中收集到的液体中最先出现的是相对分子质量较小的蛋白质 C．用图乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5 mL，连续收集
D．图丙装置中电泳法分离提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极移动
【解析】 图乙装置表示通过凝胶色谱法分离蛋白质的过程，蛋白质的相对分子质量较大，被排阻在凝胶颗粒的外面，在颗粒之间迅速通过。
【答案】 B
13．已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示。下列叙述正确的是( )
A．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子甲也保留在袋内
B．若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快
C．将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子丙也存在于沉淀中
D．若五种物质为蛋白质，用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最近
【解析】 透析的原理是相对分子质量小的物质能透过半透膜，相对分子质量大的物质不能透过，乙保留在袋内，甲则不一定保留在袋内；凝胶色谱柱分离时，相对分子质量小的物质路程长、移动慢；离心时相对分子质量大的物质先沉淀，戊沉淀，则乙、丁、丙均已沉淀；用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质时，电泳迁移率主要取决于分子大小。
【答案】 C
14．对蛋白质进行研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题： (1)蛋白质的提取和分离一般分为四步：________、________、________和纯度鉴定。 (2)在血红蛋白的提取与分离实验中，采集新鲜血液前要在采血容器中加入柠檬酸钠溶液的目的是______________。
(3)样品的处理过程又可以细分为：红细胞的洗涤、________和分离血红蛋白溶液。其中分离血红蛋白溶液时需要用到________(仪器)分出下层红色透明液体。
(4)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析进行粗分离。
①透析的目的是__________________________________________________； ②透析的原理是___________________________________________________ ________________________________________________________________。
(5)装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡，一旦发现有气泡必须重新装填。这是因为____________________________________________________
________________________________________________________________。
(6)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
①样品纯化的目的是______________________________________________； ②血红蛋白的特点是______________________________________________； 这一特点对分离蛋白质的意义：____________________________________ _________________________________________________________________ ________________________________________________________________。
【解析】 透析袋能使小分子物质自由进出，而大分子物质被保留在袋内，所以透析可以除去相对分子质量较小的杂质；样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量不同的杂质蛋白除去；血红蛋白呈现红色，在用凝胶色谱法分离时可以通过观察颜色来判断收集洗脱液的时机；同时，通过观察颜色，使血红蛋白的分离过程更直观，大大简化了实验操作。
【答案】 (1)样品处理 粗分离 纯化 (2)防止血液凝固 (3)血红蛋白的释放 分
液漏斗 (4)①去除相对分子质量较小的杂质 ②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则被留在袋内 (5)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 (6)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂蛋白除去 ②呈现红色 在用凝胶色谱法分离血红蛋白时，可以通过观察颜色来判断什么时期应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作
15．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和部分CO2
的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题：
(1)将实验流程补充完整。
(2)凝胶色谱法的基本原理是根据________分离蛋白质。
(3)洗涤红细胞的目的是去除________，洗涤干净的标志是________________。 (4)下图1是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入示意图，正确的加样顺序是____________。如果红色区带________，说明色谱柱制作成功。
图1
(5)图2、图3分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到的结果，则图3中与图2中蛋白质P对应的是________。
图2 SDS凝胶图3 Sephadex G－75
电泳结果凝胶色谱分离结果
【解析】 (1)样品处理包括：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液。凝胶色谱操作包括：凝胶色谱柱的制作、凝胶色谱柱的装填、样品的加入和洗脱。(2)凝胶色谱法的基本原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质。(3)洗涤红细胞的目的是去除杂
蛋白，洗涤干净的标志是上清液中没有黄色。(4)加样顺序是：调整缓冲液面、滴加透析样品、样品渗入凝胶床、再调整缓冲液面。如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。(5)SDS凝胶电泳装置是垂直的装置，此种电泳方法主要取决于蛋白质相对分子质量的大小，与电荷无关，同时加样在“－”极，通电后，样品蛋白质向“＋”极移动，相对分子质量小的，移动距离大，因此从图2的电泳结果分析，P比N、M移向“＋”距离大，说明P的相对分子质量比较小，因此洗脱出来的时间比较长，符合图3中的丙。
【答案】 (1)血红蛋白的释放 凝胶色谱柱的装填 (2)相对分子质量的大小 (3)杂蛋白(或血浆蛋白)
离心后的上清液中没有黄色均匀一致地移动丙 (4)④①②③ (5)