发布时间 : 星期日 文章AU系列生化分析仪参数详解更新完毕开始阅读2fc0f6292e3f5727a4e96259
AU系列生化仪的部分参数界面及名词解释
AU系列生化仪的部分参数界面及名词解释
AU系列生化仪进入中国后，颠覆了以往国人对生化仪盘式进样的理解。AU自带轨道的设计显得高大上，而且速度一直是AU系列的看家法宝，让先期进入中国的贝克曼和日立毫无招架之力。不过，随着自动生化仪的普及，人们发现AU的速度并非优势，结果的不可靠性开始出现，质疑声不断。AU的搅拌系统和杯冲洗系统一直成为问题，污染和滴落甚至漫盘让操作者伤透了脑筋，还为此被加拿大药监局召回。当然还有它的半导体冰箱问题。
不过，任何机器都会出问题，也都要保养，保养不够就会遭到报应。现在的中国人恨不得回到石器时代，拿起来就用，用完不管。要求所有的机器都做到召之即来，来之能战，战之能胜。但就是没有保养，也不想维护，更不用说维修了，那是花钱的玩意儿，而前者则是费时费力的事情，也是不愿意做。
其实，严格的保养维护作业，成本并没有增加多少，时间也花费不多，却能得到稳定可信的结果。所有的生化仪结果问题，大多出在保养和对设备的理解上。而在设备的理解上，相关名词的理解最为重要，因为它直接引导你的操作，一旦理解错误，那么结果不好也就顺理成章了。
AU系列生化仪从速度上分为400、800、1600、2000速。从反应盘数量上分为单盘和双盘，也就是800速以下和以上的区别。单反应盘配套试剂针和样本针各一个，双反应盘则是双倍针配套。冲洗站都是一组，搅拌系统有两组和一组的区分，AU400/480和2700/5400是一组，AU640/680/5800是两组。800速以上的机型都是两组光度计，一个灯泡通过光纤分配使用。
以上是简单的机器上面板介绍，下图是AU系列反应曲线的示意图：
图1 AU系列生化仪反应曲线示意
上图可以看出，AU的读点间隔都是18秒，整个反应周期有28个点，也就是28*18=504秒=8.4分钟。R1+S+R2方式，只能双试剂。R1加入读点为P0，S加入读点为P1，R2加入读点为P11。R1至R2时间为11*18=198秒=3.3分钟，S 至R2时间为10*18=162秒=3分钟，R2至P27最后反应点时间为16*18=288秒=4.8分钟。
AU的反应时间是固定的，只有28个点，没有长程反应。搅拌一共进行三次，分别是R1、R1+S、R1+S+R2。
上图是两条曲线，下面那条是试剂空白，上面那条是样本曲线，
下面以AU680为例，解释一些AU系列的名词。
1 空白概念：AU的空白（Blank）的概念有杯空白，其实这是反应杯的检查，在Photocal里进行，也是水空白（Water Blank，WB）；实时水空白;试剂空白（ReagentBlank，RB）。
1.1杯空白（Water Blank，WB）：AU的杯空白并不是实时的，而是需要时测定，或者执行周保养时才测定。一般更换反应杯或者灯泡或者W2清洗后才执行。而杯空白的检查是用来判断反应杯是不是在使用状态，借此判断是否自动封闭超限的反应杯。
各型号AU生化仪都有Photocal光度计校准这个菜单或者选项，在这个界面下可以选择全部反应杯或指定反应杯号的检查：
图2 Photocal光度计校准界面
这是合格的光度计校准界面，全部反应杯都是黑色字体。
绿色CuvetteCheck Error表示杯检查错误，仪器认为是擦伤。判断依据是将一个反应杯分为前后两部分进行检测，前后部分吸光度值超过0.01Abs，则认为是有划痕擦伤。
红色Mean CheckError表示平均值检查，某一个杯子反应杯的吸光度值与所有反应杯吸光度平均值的差异不能大于0.03Abs，否则该杯将被红色标记，系统自动封闭该反应杯。
橙色Lamp CheckError是灯泡检查，这一项要经过两次比对，第一次是所有反应杯在所有波长下的吸光度值小于等于1.7Abs，第二次是将所有反应杯的光度计值与更换灯泡后的该反应杯光度计值做比较，两次的结果应该小于等于0.1Abs。这两次检查有任何一次超限就会被橙色标记。
要注意的是，仪器并不知道你什么时候换的灯泡，其实是跟上一次的Photocal值做的比较。这一点与AU老型号的机器蓝色标记类似，新型号去掉了蓝色标记，改用橙色标记。
偶尔几个反应杯出现颜色标记时，可把该反应杯取出，人工清洗擦干后再行测试。或者干脆更换。出现橙色或者蓝色，可先行保存，然后接着点击检查，也就是说上次的数据可能是很久之前的，保存一次把数据库的数据覆盖，然后再检查，这样两次的比较就应该很接近，蓝色或者橙色就会消失。但如果这么操作还是无法消除橙色，就要尝试更换反应杯或者灯泡了。
大面积的出现红色，应该首先检查冲洗站，漫盘的可能性最大。大面积出现绿色或者红绿兼而有之，首先检查灯泡和灯泡供电，光源不稳可能性最大。
在Photocal检查里进行的杯空白是利用去离子水作为介质的，并不是空反应杯进行测试。所以这里的杯空白又叫水空白（Water Blank）。但Photocal并非强制性，也不是每天必须的。而且是个多合一的数据，同时是用来判断反应杯是否能够使用的依据。这个水空白的数据在定标、结果计算里会经常用到。
后面用到的水空白校正公式是：ODF（X）=OD（X）-F（X）
ODF（X）是水空白校正后的吸光度值；
OD（X）是水空白校正前的吸光度值；
F（X）是该反应杯的指定波长吸光度值；
X是0-27个读点。
1.2 实时水空白：是冲洗站每次清洗完反应杯后测定的水空白数据，这是实时的，每次清洗后的水空白数据与上次的Photocal光电校准里的水空白数据进行比较，误差太大则自动封闭，暂时不使用。
注意：如果上次Photocal检测的时候，水质出现问题，会导致所有反应杯的平均值偏高，这时并不会颜色标记。但当水质恢复后，实时空白会远远低于当初的的水空白，也不会报警。但由上次水空白记录的数据计算的结果或试剂空白可能会出现负值，导致结果错误或试剂空白失败。所以说这是一个考虑点，如果想排除这个因素的干扰，做一次Photocal保存然后再执行一次保存即可。当然可以反推，这次的水质不好也会造成结果的混乱。
1.3 双波长校正：在使用双波长的项目里，主波长的吸光度减去付波长吸光度。
双波长校正公式是：ODP（x）=ODM（X）-ODS（X）
ODP（X）是双波长校正后的吸光度值；
ODM（X）是主波长的吸光度值；
ODS（X）是付波长的吸光度值；
X是0-27个读点。
1.4 试剂空白（Reagent Blank，RB）：以去离子水为样本，按照项目参数的设置进行测试，得到的整条曲线的各个读点的吸光度值，由于只有试剂参与，所以又叫试剂空白。试剂空白的吸光度值是经过水空白校正的，也就是说减去水空白值。
试剂空白也是经过双波长校正的，根据测试方法的不同而决定是否采用试剂空白校正。END1、RATE1和FIXED1这三种方法不使用试剂空白校正，这三种方法是采用的水空白校正。
试剂空白的校正公式是：ODR（x）=ODP（X）-RB（x）
ODR（X）是试剂空白校正后的吸光度值；
ODP（X）是双波长校正后的吸光度值；
RB（X）是试剂空白吸光度值；
X是0-27个点。
图3 试剂空白示意图
由于END、RATE、FIXED三种方法都采用试剂空白校正，所以试剂空白变得非常重要。不同厂家、不同批号甚至不同试剂瓶间的试剂空白可能会相差很大，所以在菜单Calibration Parameters定标参数里，Advanced Calibration选项有批号、换瓶等选项，更换批号或瓶号即会重新定标。而重新定标之前必须先做试剂空白。
试剂空白在定标参数里，可以单独测试，也可以与定标一起测试，但绝不可以单独做定标而不做试剂空白。
而有些实验室既不执行换瓶换批号定标，也不单独执行试剂空白，或者执行试剂空白时作为样本的去离子水有问题，导致保存在仪器内的试剂空白过高，由于不检查试剂空白范围，所以并不报警。但在样本测试或定标时导致负值出现。
所以在AU系列生化仪上，试剂空白和Photocal是经常要做的，是耽误了些时间，耗费了一些试剂，但保证了结果准确，还是值得的。每日开机，可以不做定标，但试剂空白是一定要做的。
试剂空白每次执行的次数可以最大到4次，一般要选择两次以上，这样可以看出重复性，继而推导仪器可能存在的问题。连续两次试剂空白则计算平均值，三次是取两次接近的值平均，四次的话则是去掉最大最小值，剩下的两次平均。
下图是站上上截取的一幅试剂空白的图：
图4 试剂空白示意图
由图可以看出，P0-P27所有读点的吸光度值都在数据库里保存。根据测试参数的设定，有三个主要值单独标示。P0就是R1加入的吸光度值，这个值理论上同瓶试剂不会改变，或者改变范围很小。Px是第一个测试点的值，如果只有单点，那就是这个点的吸光度。Py是最后一个点的吸光度。上图是ASO项目，END方法，读点分别是10和27，那么Px就是10点的吸光度，Py就是27点的吸光度。
批号和瓶号全部输入的是位置号，也就意味着不会变更，也就不会自动定标。
下图还是这个网友提问的图片，可惜拍照的不全：
图5数据监测常规界面示意图
由于只有14-27点的数据，那就有什么看什么了。而且是单波长，所以没有双波长校正。
图中的最大OD和最小OD分别是各个波长、反应吸光度和试剂空白的个点吸光度的最大最小值。
由于数据不全，我们看上图的试剂空白，最大OD出现在P12点，0.4079，而P11点更高是0.4093，但这一点不计数。最小OD值出现在P4点，0.0062。
而反应最大OD出现在P27点，0.4331。最小读点应该在P11点之前，图上显示是0.058，比试剂空白的最低点还要低。
反应OD是根据公式计算的，终点法大体是最后选择点的吸光度减去首先选择点的吸光度乘以液体比率系数。这个后面可能会有计算方法的解释。
下图是一个完整的数据监测界面：