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微生物实验室操作指导书目录
（一）安全守则 （二）检验总则 （三）基本技术要求 （四）食品平板菌落计数
（五）食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法 （六）沙门氏菌检验 （七）金黄色葡萄球菌检验 （八）霉菌计数 （九）革兰氏染色
（十）空气中微生物的检验 （十一） 水中微生物的检验 （十二）食品接触面的微生物检验 （十三）蔬菜农残的快速检测
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化验室操作指导书（受控） 1 （一）安全守则
1 进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。
2 在进行高压、干燥、消毒等工作时，工作人员不得擅自离开现场，认真观察温度、时间，蒸馏易挥发、易燃液体时，不准直接加热，应置水浴锅上进行。
3 严禁用口直接吸取药品和菌液，按无菌操作进行，如发生菌液、病原体溅出容器外时，应立即用有效消毒剂进行彻底消毒，安全处理后方能离开现场。
4 工作完毕，两手用清水肥皂洗净，必要时可用（杀菌剂）新洁尔灭、过氧乙酸液浸泡手，然后用水冲洗，工作服应经常清洗，保持整洁，必要时高压消毒。
5 实验完毕，及时清理现场和实验用具，对染菌带毒物品，进行消毒灭菌处理，并填写日常工作记录。
6 每日下班，认真检查水、相关电源是否关闭和正在使用的设备运转是否正常，并认真记录。下班前关好门窗，方可离去。
修订 1 2011－08－18
化验室操作指导书（受控） 2 （二）检验总则
1 主题内容与适用范围
本文规定了微生物检验一般规则。
本文适用于食品中微生物学检验的采样、检验及结果报告。 2 样品的采集 2.1 采样目的
确保采集的样品能代表全部被检验的物质，使检验分析更具代表性。 2.2 采样原则
2.2.1 采集的样品要有代表性，采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在，同时能反映全部被检食品的组成、质量和卫生状况。
2.2.2 应设法保持样品原有微生物状况，在进行检验前不得污染，不发生变化。
2.2.3 采样必须遵循无菌操作程，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，新洁尔灭、酒精等消毒物灭菌，更不能含有此类消毒药物，以避免杀掉样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可使用。 2.3 采样数量
取样数量的确定，应考虑分析项目的要求、分析方法的要求及被检物的均匀程度三个因素。样品应一式三份，分别供检验、复检及备查使用，每份样品数量一般不少于200g。
根据不同种类采样数量略有不同，实验室检验样品一般为25克。 2.4 采样方法
2.4.1 采取随机抽样的方式。
2.4.2 直接食用的小包装食品，尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。 2.4.3 如为非冷藏易腐食品，应迅速将所采样品冷却至0－4℃。 2.4.4 不要使样品过度潮湿，以防食品中固有的细菌增殖。
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化验室操作指导书（受控） 3 2.4.5 在将冷冻食品送到实验室前，要始终保持样品处于冷冻状态。样品一旦融化，不可使其再冻，保持冷却即可。 2.5 样品的保存和运送
2.5.1 样品采集完后，应迅速送往实验室检验，送检过程中一般不超过3h，如路程较远，可保存在1－5℃环境中，如需冷冻者，则在冷冻状态下送检。
2.5.2 冷冻样品应存放在－15℃以下冰箱内；冷却和易腐食品应存放在0－5℃冰箱或冷却库内；其它食品可放在常温冷暗处。
2.5.3 运送冷冻和易腐食品应在包装容器内加适量的冷却剂或冷冻剂。保证途中样品不升温或不融化。
2.5.4 待检样品存放时间一般不应超过36小时。 3 检验样品的制备
3.1 样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。
3.2 检验冷冻样品前应先使其融化。可在0－4℃融化，时间不超过18小时，也可在温度不超过45℃的环境中融化，时间不超过15分钟。
3.3 检验液体或半固体样品前应先将其充分摇匀。如容器已装满，可迅速翻转25次；如未装满，可于7s内以30cm的幅度摇动25次。从混样到检验间隔时间不应超过3分钟。 3.4 开启样品包装前，先将表面擦干净，然后用75％乙醇消毒开启部位及其周围。 3.5 非粘性液体样品可用吸管吸取一定量，然后加入适量的稀释液或培养基内，吸管插入样品内的深度不应超过2.5cm,也不得将吸有样品的吸管浸入稀释液或培养基内。 3.6 粘性液体样品可用灭菌容器称取一定量，然后加入适量的稀释液或培养基。
3.7 固体或半固体样品可用灭菌的均质杯称取一定量，再加适量的稀释液或培养基进行均质，从样品的均质到稀释和接种，相隔时间不应超过15分钟。 4 检验
4.1 实验室收到样品后，首先进行外观检验，及时按照国家标准检验方法进行检验，检验过
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