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科文学院毕业论文（设计）开题报告表
课题题目 指导教师 课题组成员 毕业生年级 08生物技术 1．研究的目的和意义 通过对wsp 基因的特异性扩增和测序, 发现了Wolbachia 在杂拟谷盗体内的感染。利用所测序列和其他已发表的序列建立系统发育树,结果表明杂拟谷盗体内的Wolbachia与螯蜂遗产距离相距较远。 2．国内外研究进展及分析 立 题 依 据 随着分子生物学方法的快速发展, 尤其是PCR 技术的发展和分子系统学方法的应用使Wolbachia 的检测有了重大突破( Stouthamer et al . , 1993) 。已有多种不同的目的基因用于Wolbachia 的系统研究, 其中包括16S rDNA、23S rDNA、细胞分裂蛋白基因f tsZ、细菌热激蛋白基因groE 和细菌表面蛋白基因wsp 。wsp 基因是一种编码Wolbachia 表面蛋白的基因。Braig 等( 1998) 首次从感染了Wolbachia 的果蝇Drosophila 卵中成功地纯化了Wolbachia 表面蛋白,随后进行了wsp 基因的克隆和测序。Zhou 等( 1998)在wsp 序列分析的基础上, 把A 群和B 群又细分为12 个亚群( subgroups) 。van Meer 等( 1999) 在A 群中增加了1 个亚群, 在B 群中增加了6 个亚群, 这样亚群数增加到19 个, 针对这些亚群设计了wsp 基因诊断的PCR 特异引物, 建立了Wolbachia 的基因诊断技术。我们首次报道了Wolbachia 在杂拟谷盗体内的感染, 并将其与其他已知Wolbachia 株系之间的系统关系进行比较 。 赤拟谷盗与杂拟谷盗体内Wolbachia的wsp基因序列测定与系统发育分析 明庆磊 职称 完成时间 2012.4 讲师 精品文档
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3．主要参考文献 [1]Braig HR, Zhou W, Dobson SL, ONeill SL, 1998. Cloning andcharacterization of agene encoding the major surface protein of the bacterial endosymbiont Wol bachia pipientis. J . Bacterial . , 180: 2 373- 2 378 [2]Breeuwer JAJ, Werren JH, 1990.Microorganisms associated with chromosome destruction and reproductive isolation between two insect species.Nature , 346: 558- 560 [3]Cong B, Stouthamer R, Schilthuizen R, 1998. Parthenogenesis of wasps and Wolbachia. In: Cheng DF ed. Prospect s of Plant Protect ion in 21 Century. Beijing: China Science and Technology Press. 665- 669[ 丛斌, Stouthamer R, Schilthuizen R, 立 1998. Wolbachia 与寄生蜂的孤雌生殖. 见: 程登发主编. 植物保护21 世纪展望. 北京: 中国科学技术出版社. 665- 669] 题 [4]Dyson EAM, Kamath MK, Hurst GD, 2002. Wolbachia infect ion associated with al-l 依 female broods in Hypolimnas bolina ( Lepidoptera:Nymphalidae) : evidence for horizontal t ransmission of a butterf ly male killer. Heredity , 88( 3) : 166- 171 [5] Fu HB, Cong B, Dai QH, 2005. Wol bachia endosymbiont s in Trichogramma and 据 their impacts on the host s. Chinese Journal of Biological Control , 21( 2) : 70- 73[ 付海滨, 丛斌, 戴秋慧, 2005. 赤眼蜂内生菌沃尔巴克氏体及其对宿主影响. 中国生物防治, 21( 2) : 70- 73] [6]Hertig M, 1936. The rickettsia, Wolbachia pipientis ( gen. et sp. n. ) and associat ed inclusions of the mosquito Culex pipiens . Parasitology, 28:453- 486 [7]Jeyaprakash A, Hoy MA, 2000. Long PCR improves Wol bachia DNA amplif ication: 精品文档 wsp sequences found in 76% of sixty-three arthropod species. Insect Mol . Biol . ,9( 4) : 393- 405 精品文档
赤拟谷盗(Tribolium castaneum)与杂拟谷盗(Tribolium confusum)是面粉厂及粉类储藏库中的重要害虫。遍布全世界，食性复杂，为害禾谷类、米类、油料、豆类、糠麸以及其它储藏物品。其中以面粉、玉米、油料受害最严重。既然它们同域混合发生，在自然界有可能发生杂交。故本文对此予以极大的关 研究内容 注，经实验初步研究发现，在实验室强制条件下把赤拟谷盗与杂拟谷盗进行杂交，赤拟谷盗雄虫与杂拟谷盗雌虫杂交所产生的后代少，相反，赤拟谷盗雌虫与杂拟谷盗雄虫所产生的后代多。造成这种正反交不对称可能种间核质不亲和所致，也可能是由Wolbachia引起的胞质不亲和所致。故本研究采用PCR 方法, 检测赤拟谷盗与杂拟谷盗是否存在，对Wsp基因进行了序列测定和分析，构建了其系统发育关系，以确定其体内Wolbachia 的进化位置，推测了其可能对种间杂交造成的影响。 本研究采用PCR 方法, 检测了杂拟谷盗体内Wolbachia 的感染情况并对感染个体的Wsp 基因进行了克隆与序列测定, 通过与其他已知Wolbachia株系间的wsp 基因序列进行对比分析, 确定其体内Wolbachia 的进化位置。 技术路线 和实施方案 精品文档
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通过对wsp 基因的特异性扩增和测序, 发现了Wolbachia 在杂拟谷盗体内的感染。但是并未在赤拟谷盗体内发现Wolbachia。利用所测序列和其他已发表的序列建立系统发育树,结果表明杂拟谷盗体内的Wolbachia与螯蜂遗产距离相距较远。 预期结果 指导教师意见 院系意见 （签名） 年 月 日 （签名） 年 月 日 精品文档