发布时间 : 星期日 文章1.2 基因工程的基本操作程序-人教版高中生物选修三练习更新完毕开始阅读4632a1620b12a21614791711cc7931b765ce7be2
26. （11分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，
只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答：
(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、 、将目的基因导入受体细胞、 ．
(2)A过程需要的酶有 和 ．
(3)要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用 处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为 态；然后将在缓冲液中混合培养完成转化过程． (4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C] 和[E] ．如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入 ．
(5)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键
是 ．这需要通过检测才能知道，检测采用的方法 ． 三、识图作答题（本大题共4小题，共31.0分）
27. （7分）人类复合型免疫缺陷症患者体内缺失腺苷酸脱氨酶（ADA）的基因，导致
体内缺乏腺苷酸脱氨酶。随着基因工程的不断发展，科学家利用基因治疗治愈了人类复合型免疫缺陷症，过程如下图所示。
回答下列问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，图中①代表的步骤是________。 （2）图中⑧表示目的基因的检测与鉴定。检测ADA基因是否存在T细胞中，用PCR技术进行扩增时，应提取T细胞中的________（填“mRNA”“总RNA”或“DNA”）作为PCR模板，从而筛选出含ADA基因的T细胞。检测ADA基因是否转录时，未出现ADA基因转录的mRNA，从基因表达载体的构建角度推测，最可能的原因是________。
（3）含ADA基因的T细胞必需要能产生________，才能注入患者体内，达到治疗疾病的目的。这种治疗方法属于基因治疗，基因治疗是指________。 （4）基因工程中常用的载体，除上图所示以外，还有________和________。
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28. （8分）下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图同答：
_____、_____、 （1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤是：获取目的基因、
____。科学家获取绿色荧光蛋白基因所选用的限制酶是________，最终获得的绿色荧光蛋白基因的末端类型属于___________。
（2）在重组质粒中，除了绿色荧光蛋白基因和复制原点外，还应有___________。 （3）将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞，常用的方法是________。图中的猪卵母细胞一般处在________期。
29. （8分）人体内胰岛素基因控制合成出一条称为前胰岛素原的肽链，该肽链加工时
切除引导肽等部分片段后，形成A、B两条肽链并构成胰岛素。如图是运用基因工程技术制备胰岛素的部分流程图，据图回答下列有关问题：
（1）①过程表示从____________（填“胰岛A细胞”、“胰岛B细胞”或“胰岛A细胞和胰岛B细胞”）中获取胰岛素基因相应的mRNA。②过程需要的酶是____________。为保证该基因能翻译出肽链，还需在该基因的上游和下游分别添加部分核苷酸序列，添加的这些序列将转录形成mRNA中的__________________________。
（2）③过程表示的是基因工程基本操作程序中的____________________，该过程需要用到的酶是_______________。
（ 3）大肠杆菌和酵母菌是④过程常用的工程菌，该类工程菌的优点是
______________。大肠杆菌作为工程菌时，合成的胰岛素原需要在体外加工形成胰岛素，该过程需要的酶是___________；用酵母菌做工程菌时，可从培养液中提取出具生物活性的胰岛素，其原因是____________ 。
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30. （8分）干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血只能提取
0.5 μg，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。阅读材料完成(1)～(3)题。
（1）质粒的化学本质是__________，用______技术可使获得的基因迅速扩增。 （2）基因工程的基本操作程序主要包括_____个步骤，形成③的过程是
_________________，它是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心，干扰素基因和细菌质粒能结合形成③，最重要的原因是它们经酶处理后具有
_______________________，③的组成中，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及______________________等。
（3）干扰素基因能否在酵母菌细胞内稳定遗传的关键是
________________________，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是___________________________。
四、探究题（本大题共1小题，共8.0分）
31. （8分）在基因工程的实验中，为达到在大肠杆菌中大量表达相应蛋白质的目的，
研究人员进行了如图所示的基因工程相关操作。请据图分析回答下列问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、________、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
（2）图中表示用BamHI获得目的基因与运载体后，可用________酶处理后获得a，在质粒中的抗氨苄青霉素基因称为________，在筛选中起作用。
（3）若要使大肠杆菌转化为感受态，须用________进行处理，然后将重组质粒和感受态细胞放在________中混合培养完成转化过程。
（4）如果要检测目的基因是否成功表达出蛋白质，可以从培养后的转基因的大肠杆菌中提取出________，用相应的抗体进行________操作，若有________出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。
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答案和解析
1.【答案】D
【解析】【分析】
本题考查了基因工程的相关知识，要求学生理解基因工程的概念、操作步骤及运用。难度一般。
【解答】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定；其中关键技术是构建基因表达载体；基因工程能按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。所以其优势是可定向地改造生物遗传性状，同时消费者对转基因产品应该有选择权，故A、B、C正确。基因工程中产生的可遗传变异属于基因重组而不是染色体变异，故D不正确。 2.【答案】D
【解析】【解答】
A、基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子等，因此用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体，A正确；
B、利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列，B正确；
C、标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞，因此用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌，C正确；
D、目的基因是四环素抗性基因，受体细胞不能含有抗性基因，因此用Ca2+处理大肠杆菌后，将表达载体导入不具有四环素抗性的大肠杆菌中，D错误。 故选：D。 【分析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项。
3.【答案】C
【解析】【解答】
A.由题意可知，A处的导入方法应用显微注射法，因为是将目的基因导入动物细胞，A错误；
B.B处操作的实质属于无性生殖，体外受精属于有性生殖，B错误；
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