发布时间 : 星期六 文章生（中）药概论实验指导 - 图文更新完毕开始阅读4d430648f11dc281e53a580216fc700abb6852e2
实验十 种子类生药
马钱子(番木鳖)Semen Strychni
一、实验目的：
1．掌握马钱子生药性状与组织特征。 2．熟悉马钱子显微化学试验方法。 二、实验主要仪器及试剂：
显微镜、临时装片用具、水合氯醛试液、1％硫矾酸试剂、浓硝酸。 三、实验材料：
马钱子Strychnos nux-vumica L．马钱子生药、组织横切片及粉末。 四、实验内容及步骤：
1．性状鉴定 ’ ．
(1)观察马钱子，注意其形状、色泽、大小以及种子表面密被丝状匍匐毛的特征。
(2)注意种子边缘隆起的脊线和微突的珠孔，底面中心圆点状种脐。在种脐和珠孔间有一条隐约隆起的线o
(3)种皮极坚硬，将其软化后沿边缘剖开，可见淡黄色角质状肥厚的胚乳，近珠孔处有胚，2枚子叶呈心脏形，菲薄，注意子叶叶脉数。 本品有剧毒，尝味时要注意o 2．显微鉴定
(1)镜检马钱子组织横切片，自外向内观察下列特征：
①种皮每一个表皮细胞均向外延长，形成单细胞非腺毛，并向一方倾斜，壁极厚，强烈木化，有纵肋约l0条，基部稍膨大，有纹孔及孔沟，形似石细胞。 ②种皮内层为数列棕色颓废的薄壁细胞。
③胚乳细胞呈多角形，壁厚，隐约可见胞间连丝(以碘液处理后较明显)，细胞中含有脂肪油滴和少量糊粉粒。
(2)刮取马钱子表面毛茸，用水合氯醛试液透化后装片镜检，可见非腺毛单细胞，多碎断，完整者长550~1100μm，直径25—63μm，壁强木质化，基部膨大似石细胞，直径为约至75μm，壁极厚，纹孔纵裂缝状。毛体部无色或淡黄色，圆柱形，顶端钝圆，壁具5~l 8条纵向脊状增厚，易纵裂成片，宛如纤维，单个裂片直径3~9μm。 3．理化鉴定
(1)取干燥种子的胚乳部分作徒手切片，加1％硫矾酸试剂l滴，胚乳显蓝紫色。
(2)另取一片，加浓硝酸1滴，胚乳显橙红色。
五、作业：
1．绘马钱子种子毛茸图。
2．记录马钱子显微化学试验反应结果，并阐明其原理。 六、思考题：
当前在我国马钱属Strychnos L．植物中，可作马钱子人药的有哪些种?不可入药者有哪些种? 鉴别的依据是什么？
附录一
常用试剂配制法
1、间苯三酚试液
取间苯三酚l g，加95％乙醇20ml使溶解即得。
试料加本液1滴，2~3分钟后，再加浓盐酸l滴，木化细胞壁显红色，红色的深度依木化的程度而异。盐酸需贮在具塞玻璃瓶中，防止吸湿而变稀。此酸用20％过氯酸代替则更好。
2．间苯三酚硫酸试液： 取硫酸5ml．，慢慢加入蒸馏水中，混匀，冷却后加入间苯三酚试液10ml中，混匀即得。
试料加本液1~2滴，木化细胞壁显红色，其显色深度依木化程度而异。由于本液不产生盐酸气，故较上液更好。 3．硫酸苯胺试液：
取硫酸苯胺lg，加水70ml溶解，再加95％乙醇30ml，硫酸3g，混匀即得。 试料加本液1~2滴，木化细胞壁显黄色，且可使草酸钙晶体溶解。
4. 醋酸苯胺试液：
取苯胺l g，加醋酸2ml及50％乙醇97ml，混匀即得。 用途同上，但不会溶解草酸钙结晶。 ．
5.碘液：
用N/50碘液,或取N/10碘液10m1加蒸馏水稀释至50ml即得；或取碘化钾7g溶于20m1水中，加碘2.5g溶解后，加水至1 000ml。
试料加本液l滴，淀粉显蓝色至蓝紫色，蛋白质显黄色。 ，
6.硫酸（66%V/V）
取浓硫酸66ml，慢慢加入于适量(约34m1)蒸馏水中，边加过搅拌，冷后补加少量蒸馏水使全量至100 ml即得。 7．氯化锌碘试液：
取碘化钾13g，加蒸馏水21m1溶解。
再加碘1g,搅拌至溶解，然后加入碘化锌40g使溶解即得。此液应遮光贮存，且只能在短时间内稳定，宜装入小形棕色玻璃瓶中备用。 试料加本液1~2滴，纤维素细胞壁显蓝色至蓝紫色，木化细胞壁显黄色至棕色。
8．氢碘酸：
含碘化氢57%的氢碘酸即可。用途与氯化锌碘试液相同，但较灵敏而迅速。 9. 氨制氧化铜试液(简称“铜氨液，，)：
有两种配制法：(1)取硫酸铜0.5g，溶于25％氨水10ml。放置数小时后，倾取上清液供用。（2）取碳酸铜0.5 g，入研钵中加水10ml研匀，再逐渐加入浓氨水（比重0.80）10ml,并不断搅拌使溶解即得。本液不稳定(约半月)，每次宜少量配制密塞贮存。
试料加本液l~3滴，纤维素细胞壁膨胀而后逐渐溶解。
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10．苏丹红(或苏丹Ⅲ)试液：
有二种制法：(A)取苏丹红或苏丹Ⅲ(Sodan Red G或SodanⅢ)0.0lg，加95％乙醇5ml溶解后加甘油5ml混合即得。（B）取苏丹红0.0lg，溶于乙酐20马力加甘油10ml混合即得。
试料加本液1~2滴，木化细胞壁、角质、油脂、蜡质、挥发油、树脂均显红色。
11．紫草试液：
取紫草根粉l g，加90％乙醇10ml浸渍24小时后滤过，滤液中加入等量甘油，混合，放置2小时，滤过即得。置棕色玻璃瓶中贮存。在两个月内使用。用途与苏丹红试液相同。 l 2．锇酸试液：
取锇酸0.l g，溶于蒸馏水5ml中，即得。本品须密塞避光贮存。脂肪油遇本液染成棕色至蓝色，挥发油与树脂均不染色。
13.多能试剂：先分别配下列三种溶液：(1)取乳酸20ml，加苏丹红或苏丹Ⅲ至饱和为止，加乳酸30ml稀释。(2)硫酸苯胺0.55g溶于35ml蒸馏水中。(3)碘化钾0.55g及碘0.05g溶于蒸馏水5ml中，再加入55％乙醇5ml，将上述三液混合，搅拌加入浓盐酸(37％)25ml。此液不过滤，直接供用。
试料加本液2~3滴，慢慢加热，必要时补加少量试液，并加盖玻片。木化细胞壁变黄色，木栓化细胞壁变红棕色，脂肪油变红色，淀粉变蓝紫色。 14．三硝基酚(苦味酸)试液：
取三硝基酚l g加蒸馏水或90％乙醇95ml溶解，即得。
蛋白质遇本液呈黄色，染糊粉粒时，须用醇液，以免蛋白质溶解。 ． 15．硝酸汞试液即(米龙试液)有两种配制法：
(A)取汞1m1，加发烟硝酸(比重1.52)9ml，反应时须保持混合物冷却。当反应完毕后，加水1 0ml。(B)取氧化汞(红色或黄色品)40g，可加亚硝酸钾液数滴，以恢复其活性。
本液可使含酪氨酸的蛋白质呈砖红色，灵敏度1：20000。 l 6．三氯化铁试液：
取三氯化铁10g溶于蒸馏水l00ml，临用前取此液1 ml，加水9ml稀释。 鞣质及多元酚(黄酮类等)遇本液显蓝黑色或绿色。 1 7．钨酸钠试液：
取钨酸钠1 g与醋酸钠2g，加蒸馏水溶解使10ml，即得。 鞣质遇本液生成黄棕色至红棕色沉淀。 1 8．ɑ-萘酚试液
取ɑ-萘酚lg，溶于95％乙醇l 0ml即得。
本液与30％W／W硫酸配合应用，可使菊糖呈胭脂红色并溶解。 20．钌红试液：
取钌红80mg，加l0％醋酸铅溶液100ml使溶解即得。此液易失效，宜临用前配制。避光贮存，用量少时，可于临用前，用针尖挑取少量钌红溶于少量l0％醋酸铅溶液中，使呈酒红色，即得。直接将钌红溶于蒸镏水中较好。 含果胶质的细胞壁，酸性粘朊及糖元，遇本液染成红色。 ， 21．可拉林钠溶液：
有两种配制法：(A)取可拉林或玫红酸0.5g，溶于90％乙醇l0ml中(甲液)，另
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取结晶碳酸钠25g，溶于蒸馏水100ml中(乙液)。将两液分别装瓶贮存，临用时取甲液1ml与乙液20ml混合即得。(B)取碳酸钠3g溶于7ml蒸馏水中，临用时，取此液少量，加可拉林l小片，使呈粉红色即得。混合液不耐贮存。 胼胝体及筛板遇此液呈粉红色，木化细胞壁，淀粉粒及某些粘液质也可染成粉红色。
22．亚甲兰试液：
配成两种溶液供用。(1)醇溶液：取亚甲兰0.1 g，溶于95％乙醇25ml中；(2)甘油溶液：取亚甲兰0.1 g溶于95％乙醇及甘油25ml中o 、
检识粘液时，先加醇溶液l~2滴，加盖玻片过l~2分钟后。再加入甘油溶液粘液呈天蓝色o
23．硫堇试液： ’
取硫堇0.2ml，溶于25％乙醇100ml即得。
粘液质或粘朊遇本液染成红色至紫色并膨胀成球形团块o 24．墨汁：
取商品墨汁，于临用前加蒸馏水稀释l0倍。
粘液质或粘朊不着色而呈透明块状，其它细胞壁及细胞内含物均呈黑色o 25．水合氯醛液：
取水合氯醛50g，加水20ml，使溶解即得。
此为常用透化剂，可使皱缩的细胞膨胀，并可溶解多种成分，如叶绿素、树脂、挥发油、蛋白质、淀粉等。 26．乳酸氯醛：
取水合氯醛50g，溶于乳酸50ml中即得。 为透化剂，用于难透化样品，用法同水合氯醛。 27．乳酸酚：
取苯酚(石碳酸)2g，乳酸2g，甘油2g与蒸馏水2ml，混合即得。为常用封藏剂之一。
28．甘油醋酸液(史氏溶液)：
取甘油，50％醋酸，蒸馏水各等量混合即得。为常用封藏剂之一。 29．稀甘油：
取纯甘油l 0ml加蒸馏水20ml，混合即得；为常用封藏剂之一 30．次氯酸钠溶液(漂白液)：
取漂白粉l0g；分次加蒸馏水75ml研匀，另取结晶碳酸钠l 5g溶于25ml蒸馏水中，分次加入漂白粉液中，搅匀放置沉淀后取上清液，必要时过滤。 31．硝铬酸液：
取铬酸(三氯化二铬)l0g，溶于l0％硝酸中'，使全量为100ml，即得。用于木化组织的解离。
32．5％氢氧化钾溶液：
取氢氧化钾5g，溶于蒸馏水100ml中，必要时用玻璃棉或垂熔玻璃漏斗过滤即得。用为透化剂及薄壁组织解离剂。亦可用5％氢氧化钠代替。 33．稀氨液(氨溶液、氨水)：
含氨(NH4)l0％W/W，取浓氨液40ml，加蒸馏水稀释至全量为100ml即得。 34．盐酸、稀盐酸：
如未指明浓度，盐酸即指浓盐酸，稀盐酸指10％W／W盐酸。