微生实验报告 2012.12.实验十二、细菌常用生理生化反应实验结果观察测定 联系客服

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阳性:产气杆菌(溴麝香草酚蓝的斜面呈蓝色,右图)

阴性:大肠杆菌(斜面培养基不变色,左图)

6、明胶水解实验

阳性:枯草杆菌(加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液,菌落周围出现透明圈,下图)

阴性:大肠杆菌(菌落周围没有出现透明圈,上图)

7、淀粉水解实验

阳性:枯草杆菌(加入碘液,菌落周围出现透明圈,下图)

阴性:大肠杆菌(菌落周围没有出现透明圈,上图)

8、产硫化氢实验

阳性:变形杆菌(出现黑色沉淀,左图)

阴性:大肠杆菌(未出现黑色沉淀,右图)

思考题

1、你的实验结果与实验预期是否相同?如果不同试分析原因。

答:实验结果与预期基本相同,但部分实验的结果并不明显,无法鉴别阳性与阴性。

经分析原因可能有如下几种:

(1)接种时,出现污染情况,菌种混杂; (2)操作时将其暴露于空气中,影响实验结果; (3)原菌种经多次实验,已经被混合。

2、你认为在做生理生化反应实验中应注意什么问题?

(1)配制培养基时,各种成分要加齐,不要漏掉某种成分且要保证比例正确。

(2)接种时注意严格遵守操作规程,避免外界杂菌混入,每接种完一次接种环都要严格彻

底灭菌,以免菌种混杂。

(3)接种前,培养基应严格灭菌,且注意灭菌温度条件,以免破坏培养基成分。 (4)整个操作过程要严谨,尽量保证无菌环境下进行。

3、在方法一中,培养基中的柠檬酸铁氨和Na2S2O3分别起什么作用? 答:柠檬酸铁氨与硫化氢反应产生黑色沉淀可以用来检验硫化氢的生成。

4、甲基红实验和乙酰甲基甲醇实验的最初作用底物及终产物有何异同点?为什么会出现最终产物的不同? 答:甲基红试验

肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使培养基PH值下降至pH4.5以下,使甲基红指示剂变红。 (甲基红是一种酸碱指示剂) 乙酰甲基甲醇实验

而乙酰甲基甲醇实验是用来测定某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力,如丙酮酸。丙酮酸进行缩合、脱羧生成乙酰甲基甲醇,此化合物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰。二乙酰与蛋白胨中精氨酸的胍基作用,生成红色化合物,即伏-普阳性反应,不产生红色则为阴性。 产气肠杆菌为阳性,大肠杆菌为阴性。

5、培养基中的吲哚是怎样产生的?是用什么方法来测定的?

答:通过某些细菌如大肠杆菌能够分解培养基内蛋白胨中的色氨酸,产生吲哚。

通过加入吲哚试剂,使吲哚与吲哚试剂中的对二甲基氨基苯甲醛结合形成肉眼可见的红色化合物。

6、在结果观察中,为什么要加入乙醚?

答:加乙醚是为了将培养基中色氨酸水解生成的吲哚萃取出来,吲哚再与滴入的吲哚试剂发生反应,产生颜色反应。

7、你实验的所用菌种产生的明胶酶是胞内酶还是胞外酶?

答:胞内酶

8、你试验的所用菌种产生的淀粉酶是胞内酶还是胞外酶? 答:胞外酶