发布时间 : 星期三 文章液相色谱溶剂系统与优化-天施康内部培训更新完毕开始阅读606f3c4c33687e21af45a929
水。
溶解性受温度影响很大。因此当使用的溶剂组成接近溶解饱和度时，就必须关注其是否可能会发生沉淀。
另外，溶解时会显著放热（例如醇与水混合）或者吸热（例如乙腈与醇混合），混合后的体积会缩小或者增大。
4、缓冲剂及其他添加剂：用量及浓度（结晶析出的问题） 5、挥发性：流动相脱气时应注意。 6、不同溶剂的注意事项
水：纯化水的要求；
醚：四氢呋喃等，容易形成过氧化物； 醇类和酮类：截止波长高
含氯烷烃：氯仿、二氯甲烷等，见光降解，通常此试剂中加稳定剂； 7、样品溶液
溶解样品的溶剂应采用流动相，可避免系统峰的干扰。 溶剂峰和溶剂效应
第四小节：薄层色谱法及溶剂系统
一、薄层色谱法的基本理论和概念 1、基本概念和理论 比移值（Rf） 分离度与分离数 塔板数与斑点宽度 斑点压缩效应
展开方式（上行、下行、直线、圆形等等）；
洗脱规律：一般认为吸附色谱的原理是竞争吸附。样品的极性越大，越容易被吸附因而Rf越小；而流动相的极性越大，洗脱能力越强因而Rf越大。
小常识：展开距离的平方与所需时间成正比，展开距离加倍则消耗4倍时间。
2、直线展开中Rf值与k值（容量因子）的对应关系
k Rf 0 1 0.5 0.67 1 0.50 2 0.33 3 0.25 4 0.20 5 0.17 6 0.14 7 0.12 8 0.11 9 0.10 上表数值显示，k值小于4的物质，占有薄层板80%的空间；而k值大于4的物质，仅占据薄层板的20%的空间。由此可知，薄层色谱适于分离k值小于4（或Rf大于0.2）的物质而不适合分离k值大的物质。k值小于4的有被薄层分离开的可能，而k值大的物质因为展开空间不够，被薄层分开的可能性很小。 二、气固平衡和液固平衡 1、气固平衡
气固平衡是平面色谱的特殊情况，对平面色谱过程有很大影响。
例证：
用乙酸乙酯分别在甲板（未经饱和的薄层板）和乙板（事先用乙酸乙酯饱和15min）上展开苏丹-Ⅱ，结果在甲板上的苏丹-Ⅱ其Rf等于1而乙板上的苏丹-Ⅱ其Rf仅为0.65。
此例说明：由于预饱和，使本来应该出现在流动相前沿的样品出现在Rf=0.65，说明真正的前沿（由毛细作用进入薄层板的流动相所抵达的位置）的确在Rf=0.65位置，而前面的流动相是预先吸附在薄层板上（肉眼当时看不出来）而被后来进入薄层板的流动相“挤”到了前面才显出了肉眼可察觉的状态。多元混合流动相的气固平衡比较复杂，固定相既优先吸附极性大的气体（蒸汽压往往偏低）的倾向；又有优先吸附蒸汽压大的气体（极性往往偏低）的倾向，故不好预测。 2、液固平衡
液固平衡的影像主要表现在多元混合流动相上。固定相优先吸附极性大的溶剂，会导致流动相组成的改变，而流动相组成的改变有可能使本来互溶的流动相在板上分层，形成多个前沿。当然，流动相组成的改变也使展开过程包含有梯度展开过程，这往往有对分离有利。 另一方面，板上液相组成的改变也会反过来影响气液平衡，从而又影响气固平衡；大气中的水分也会被薄层板吸附，这既要影响薄层板的性质，也会影响到气液和固液平衡；所有这些都难用数学语言精确描述，但又对薄层色谱过程有重大影响！ 三、薄层色谱的操作技术 1、活化
活化与否根据具体情况决定。
北方气候干燥，自然阴干与活化后的薄层板差异不大，一般可不活化；但如对重现性有较高要求，希望将所有条件严格固定，可考虑活化。
活化后的薄层板在空气中暴露3min（相对湿度50%情况下），会丧失原有活性的一半；暴露15min，吸附的水分已达最大值。因此最关键也是最困难的步骤是如何控制环境的湿度。此外，点样等操作时间也要尽可能短或严格控制。否则，活化就失去了意义。 2、饱和
是否需要饱和，存在争议。 饱和的主要目的是消除边缘效应。 饱和的好处是：Rf值的重现性较好；
饱和的缺点是：分离效果可能略逊于不饱和室，因为不饱和室的有效展开距离较长；其次是挥发可能导致薄层板上的流动相组成有微妙的变化，产生类似梯度展开的效果。
另：实际操作中我们常常讲的“饱和XX分钟”分两个层面： a.将展开剂倒入层析缸中，密闭。此时，展开剂挥发，展开剂蒸汽在展开室内到达饱和，此饱和可称之为“室饱和”。如果未达到“室饱和”即开始展开，则展开过程中薄层板上的展开剂挥发到展开室中，将会影响薄层板上的溶剂组成；
b.将薄层板放入置有展开剂的层析缸中，但未浸入展开剂中。此时，展开室内的蒸汽被薄层板吸附，当蒸汽分子在薄层板上“吸附-解吸附”达到平衡时，此时饱和可称之为“板饱和”。 室饱和和板饱和的过程可以同时进行。 另外由此可见，展开剂用量不能过小。