发布时间 : 星期一 文章植物组织培养期末复习资料更新完毕开始阅读6c72eb0a844769eae009edad
(3) 灭菌剂处理：0.1%升汞10分钟、或在2%次氯酸钠液中浸泡20-25分钟。 (4) 用无菌水冲洗3-5次左右
6、接种后离体培养物对光、温、湿等环境条件的要求？
(1) 光照：愈伤组织的诱导不需光照或弱光，器官分化需要光照，一般12－16h/d，光照度1000－5000lx。
(2) 温度：一般25±2℃
(3) 湿度：培养室内的湿度要求保持70％－80％的相对湿度。 7、论述离体培养污染产生的原因及防治措施。
污染：污染原因从病源分面主要有细菌和真菌和两大类。 原因：（1）外植体材料消毒不彻底 （2）培养基灭菌不彻底 （3）操作环境不洁净
（4）操作人员操作不规范、不熟练。 预防措施：(1)减少或防止材料带菌 (2)外植体灭菌要彻底 (3) 培养基灭菌要彻底
(4) 玻璃器皿和金属器皿的灭菌要彻底 (5)无菌室的消毒
(6)操作人员一定要严格按照无菌操作的程序进行接种。
第2章 《基本原理》复习题及参考答案
一、填空：
1、绝大多数培养植物再生植株时都先经过 愈伤组织 阶段。
★2、愈伤组织形成大致经历 诱导期 、分裂期 和 分化期 三个时期。
3、使用植物生长调节物质时要注意： 种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值 。 ★4、愈伤组织的形态发生方式主要有 不定芽方式 和胚状体 方式。
★5、组织培养细胞再分化包括四个水平：细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化（器官发生）和植株水平的分化 二、名词解释：
1、愈伤组织培养(callus culture):是指将母体植株上的外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。
2、继代培养 (subculture)：愈伤组织在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养。这个过程叫做继代培养
★3、体细胞胚（somatic embryo）又称胚状体（embryoid）：指在组织培养中，由一个非合子细胞(体细胞)，经过胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成的具有双极性的胚状结构。
4、体细胞胚胎发生：植物组织培养细胞产生胚状体的过程，称为体细胞胚胎发生。
★5、细胞全能性（cell totipotency）：每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息，在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整再生植株
三、问答题
★1、愈伤组织细胞的分化一般分几个时期？各有何特点？
（1）诱导期（起动期）：是细胞准备分裂的时期。细胞大小几不变，内部发生生理生化变化，迅速合成蛋白质和核酸。
（2）分裂期：外层细胞分裂，中间细胞常不分裂，形成小芯。细胞分裂快，结构疏松，缺少结构，浅而透明。在原培养基上，细胞必分化，及时转移，其可无限制地进行细胞分裂，维持不分化状态。 （3）分化期：细胞在形态和生理功能上的分化，出现形态和功能各异的细胞。 2、优良的愈伤组织必须具备哪4个特性？
（1）高度的胚性或再分化能力，以便从这些愈伤组织得到再生植物
（2）容易散碎，以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮系，并且在需要时能从中分离出全能性的原生质体
（3）旺盛的自我增殖能力，以便用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无性系。 （4）经过长期继代保存而不丧失胚性，便有可能对它们进行各种遗传操作。 3、愈伤组织的形态发生有哪些情况？
（1）愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成，即无根的芽或无芽的根；
（2）先形成芽，再在芽伸长后，在其茎的基部长出根而形成小植株，多数植物属这种情况； （3）先产生根，再从根基部分化出芽而形成小植株。这种情况较难诱导芽的形成，尤其对于单子叶植物；
（4）先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根，然后两者结合起来形成一株小植株。少见。
单子叶植物：与双子叶植物诱导发生过程类似，只是在形态上无鱼雷形胚等阶段，成熟体胚上有盾片、胚芽鞘和胚根等结构。
4、简述细胞脱分化过程。
细胞的脱分化过程可分为3个阶段：
第一阶段为启动阶段，表现为细胞质增生，并开始向细胞中央伸出细胞质丝，液泡蛋白体出现； 第二阶段为演变阶段，此时细胞核开始向中央移动，质体演变成原质体； 5、影响植物离体形态发生的因素有哪些？ （1）植物种类和基因型 （2）培养材料的生理状态
发育年龄：一般幼态比老态组织形态发生能力高； 培养器官或组织类型：细胞分裂旺盛的器官较好；
培养时间和细胞倍性：一般取处于旺盛生长期的愈伤来诱导器官形成。 （3）培养基
a营养成分： 一般认为，培养基中的铵态氮和K+有利于胚状体形成，提高无机磷的含量可促进器官发生; 茎尖培养和芽诱导培养基主要是MS及其修改的培养和B5培养基; 碳水化合物种类及浓度对胚状体发育有重要作用,缺糖或低糖无法形成胚状体。 b 植物激素及生长调节剂
（起主导作用，通过影响内源激素的平衡起作用
c培养基的性质：愈伤组织诱导：在固体培养基上；细胞和胚状体的诱导在液体培养基上 （4）培养条件：光照；温度；气体；湿度等
第3章 《器官和组织培养》复习题及参考答案
一、填空：
★1、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
★2、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养 和 普通茎尖培养 两种类型。前者主要是对 茎尖长度不超过0.1mm，最小只有几十微米的 茎尖进行培养，目的是 获得无病毒植株；后者是对 几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的 培养，目的是离体快繁 。 3、不定芽产生的途径： 一是从外植体上直接产生
二是从由外植体诱导产生的愈伤组织上产生。
★4、离体叶培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。
★5、在离体叶培养中，6-BA和KT利于芽的形成；2,4-D利于愈伤组织的形成
二、名词解释：
1、植物器官培养（Organ Culture）：是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养
的技术。分为营养器官（根、茎、叶）和繁殖器官（果实、种子、花器官）培养。 2、花器官培养：是指对植物的整朵花或花的组成部分（包括花托、花瓣、花丝、花药、子房、胚
珠）进行离体培养的技术。
★3、植物分生组织(meristem culture)培养：是指对植物的分生组织进行离体培养的技术，包括植
物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。
三：问答题：
1、离体叶组织中再生植株发生途径有哪些？
在离体叶组织脱分化和再分化培养中，茎和芽分化的4个途径： （1）直接产生不定芽
（2）离体叶-----愈伤组织------不定芽
（3）离体叶--------愈伤组织------胚状体 -----不定芽 （4）离体叶 → 小鳞茎或球状体 ↘愈伤组织 ↗
★2、详述胡萝卜离体根组织培养的过程，并分析引起污染的原因。 ★3、详述烟草叶片离体培养及器官发生的过程及注意事项。
第4章 《胚胎培养及离体授粉》复习题及参考答案
一、填空：
★1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。 2、离体胚的培养分为二种类型： 成熟胚 培养和 幼胚 培养。
★3、胚珠培养分二类： 受精胚珠 的培养和 未受精胚珠 的培养。未受精胚珠培养的目的是获得 单倍体植株 。
4、子房培养分 授粉子房 培养和 未授粉子房 的培养。前者培养的目的是挽救杂种胚，后者培养的目的是获得单倍体植株。
5、离体授粉的类型有离体柱头授粉、离体子房授粉、离体胚珠授粉。