发布时间 : 星期一 文章植物组织培养期末复习资料更新完毕开始阅读6c72eb0a844769eae009edad
2、原生质体（protoplast）：是指除去了细胞壁后的裸露的植物细胞。
三、问答题：
1、简述原生质体作为遗传操作和生理生化研究的材料有何特点？
（1）没有细胞壁，有利于体细胞融合、体细胞杂交、基因转移和单细胞培养。 （2）原生质体能比较容易摄取外来的遗传物质。 2、酶法分离原生质体时使用的酶的种类有哪些？ （1）纤维素酶类 （2）半纤维素酶类 （3）果胶酶类 （4）崩溃酶
3、简述一步酶法分离原生质体的方法
一步分离法：把一定量纤维素酶和果胶酶组成混合酶液，对材料进行一次性处理而分离出原生质体。处理温度25-30oC，处理的时间根据材料及酶浓度的不同而不同，可为2-24h。 ★4、如何纯化分离的植物原生质体并鉴定其活力？ (1) 原生质体的纯化
①沉降法：应用原生质体的比重大于溶液的性质而使原生质体沉于底部。 ②漂浮法：应用渗透剂含量较高的洗涤液使原生质体漂浮于液体表面。
③梯度离心法：选两种不同渗透浓度的溶液，其中一种溶液密度大于原生质体的密度，另一种溶液小于原生质体的密度。
(2) 原生质体活力的测定
①形态识别：形态上完整，呈圆形，含有饱满的细胞质，颜色鲜艳的即为存活的原生质体。 ②染色识别
1）0.1%酚番红或Evans蓝染色：有活力的不被染色，死亡的被染上色。
2）双醋酸盐荧光素(FDA)染色法：在荧光显微镜下有荧光的即为有活性的原生质体。 ★5、原生质体培养的方法有哪些？ （1）液体浅层培养 （2）平板法培养
（3）微悬滴法培养 （4）双层培养法 （5）饲养层培养
★6、原生质体融合有哪几种主要方法？
（1）化学法诱导融合；（2）PEG结合高钙-高pH诱导法；（3）电融合法
第8章 《植物离体快繁和人工种子》复习题及参考答案
一、填空：
1、原球茎发生型是兰科植物特有的一种快繁方式。
2、离体快繁商业化生产应注意的问题是快繁苗的污染、玻璃化、褐化和黄化。
3、根据繁殖体的类型人工种子可分为两类：一类是体细胞胚人工种子；另一类是非体细胞胚人工种子。 4、人工种子包裹方法离子交换法；干燥法；冷却法。 二、名词解释：
1、离体繁殖（in vitro propagation)：微型繁殖（micropropagation)，指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其在短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。是工厂化育苗的技术基础。 ★2、人工种子(artificial seeds)：亦称体细胞种子，任何一种经人工种皮包被或裸露的，具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子。 三、问答题：
1、植物快繁的器官再生主要类型？
短枝发生型；丛生芽发生型；不定芽发生型；胚状体发生型；原球茎发生型 2、植物快繁的程序。
（1）无菌（或初代）培养的建立 （2）繁殖体增殖 （3）芽苗生根 （4）小植株的移栽驯化 3、人工种子的优点。
? （1）使自然条件下不易结实或种子昂贵的材料能快速繁殖和保存； ? （2）繁殖速度快；
（3）为基因工程技术应用于生产提供桥梁； ? （4）固定杂种优势；
? （5）提高植物抗逆性； ? （6）取代天然种子，节约粮食。
第9章《植物无病毒苗木培育》复习题及参考答案
一、填空：
1、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。
★2、通过茎尖培养脱毒时，常以带1-3个幼叶原基的茎尖（约 0.3—0.5mm）作外植体较合适。 3、无病毒苗的保存分：隔离保存和长期保存两种方法。 二、名词解释：
1、无病毒苗（virus-free plantlets）：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
2、微尖嫁接技术（micrografting shoot-tip）：指在人工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技术。
3、指示植物法(indicator plant method)：利用病毒在其他植物（指示植物或鉴别寄主）上产生特定症状（枯斑和空斑）作为鉴别病毒存在与否和种类的方法。 三、问答题：
★1、植物脱毒的主要方法有哪些？其主要原理是什么？
（1）茎尖培养脱毒：病毒在植物体内的分布并不均匀，越靠近茎端的病毒的感染深度越低，生长点则几乎不含或含病毒很少
（2）愈伤组织培养脱毒法：通过植物的器官和组织的培养，脱分化诱导产生愈伤组织，然后从愈伤组织再分化产生芽，长成小植株，可以得到无病毒苗
（3）珠心胚培养脱毒：病毒一般不通过种子传播，由珠心细胞发育成的胚再生的植株是无毒的，并具有与母本相同的遗传特性。
（4）茎尖微体嫁接：将实生苗砧木在人工培养基上种植培育，再从成年无病树枝上切取0.4—1.0mm茎尖，在砧木上进行试管微体嫁接，以获得无病毒幼苗。
（5）热处理脱毒：一些病毒对热不稳定，在高于常温的温度下（35-40℃），即钝化失活 （6）化学处理脱毒：抑制或杀死病毒 2、说明微尖嫁接技术脱毒的程序
微尖嫁接技术指在人工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技术。 主要程序：无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。 ★3、目前鉴定脱毒苗的方法有哪些？各有何特点？
（1）指示植物法：将一些对病毒反应敏感、症状特征显著的植物作为指示植物（又称鉴别寄主），利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法。这种方法条件简单，操作方便，为一种经济而有效的鉴定方法
（2）抗血清鉴定法：用已知抗血清鉴定未知病毒的种类。这种方法特异性高，测定速度快。所以抗血清法成为植物病毒鉴定中最有用的方法之一。
（3）电镜检查法：可以直接观察病毒，检查出有无病毒存在，了解病毒颗粒的大小、形状和结构，又可以鉴定病毒的种类。优点是方法先进、灵敏度高、能在植物粗提取液中定量测定病毒。但需一定的设备和技术。
4、简述植物无病毒原种长期保存的方法。
（1）低温保存：将茎尖或小植株接种到培养基上，置低温（1-9℃）、低光照下保存。材料生长极缓慢，只需半年或一年更换一次培养基，又叫最小生长法。
（2）冷冻保存（又叫超低温保存），一般以液氮（-196℃）保存植物材料。在如此低温下，新陈代谢活动基本停止，处于“生机停顿”状态
第10章 《种质保存》复习题及参考答案
一、填空：
★1、种质保存分为 原生境保存 和 非原生境保存 两种方式；
2、超低温保存冷冻处理的方法包括： 快冻法、慢冻法 、预冻法和 干冻法 四种方法； 3、预冻法即分步冷冻法分为： 两步冷冻法 和 逐级冷冻法 两种方式； 4、冷冻保存后细胞和器官最基本的活力检测方法是 再培养法 。 ★5、种质资源离体保存方法有两种：限制生长保存和超低温保存。 二、名词解释：
1、种质保存（germplasm conservation）：是利用天然或人工创造的适宜环境，保存种质资源，使个体中所含有的遗传物质保持其完整性，有高的活力，能通过繁殖将其遗传特性传递下去。
2、超低温保存（cryopreservation ）：也叫冷冻保存（freeze preservation ），是指将植物的离体材料包括茎尖（芽）、分生组织、胚胎、花粉、愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等，经过一定的方法处理后在超低温（-196℃液氮）条件下进行保存的方法。
3、种质资源的离体保存：是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存，在需要时可重新恢复其生长，并再生植株的方法。
《植物组织培养技术》试题A答案
一、名词解释（每题3分，共15分）