发布时间 : 星期日 文章Nanodrop分光光度计20002000C中文操作使用说明更新完毕开始阅读710507c8ec3a87c24028c453
比色皿检测
Nanodrop 2000C可以检测最高48mm的10mm光程的比色皿。当使用微量，半 微量或者超微量的比色皿时，我们建议使用周边不透明的比色皿，不透明的 比色皿保证了光穿过样本后全部到达检测器。而透明的比色皿会让那些没有 透过样本的光也到达检测器，这样会导致检测特别是低浓度样品的检测不准 确。
当检测的波长为紫外区域时（<340nm），要使用石英白色皿，这样才能透过 紫外光。虽然有一些制造商提供紫外透过的一次性塑料比色皿，但是即使质 量最好的塑料比色皿也不能让低于220nm以下波长的紫外光透过，而大部分 玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透过性的。
一般单光束的分光光度计都会推荐相配的比色皿，而许多比色皿生产厂家都 有严格的质控来保证比色皿的性能而不用在换比色皿时需要校准，这些比色 皿都可以用在Nanodrop 2000C上。
比色皿检测样品量
在样品检测时必须保证比色皿中的样品量足够，能够让光线完整穿过样品。 2mm的光速从比色皿底部以上8.5mm的位置穿过，请参考比色皿生产厂家的 建议来确定需要的样品体积。
比色皿检测基本操作
1． 把样品加到比色皿中，要保证加入的样品量足够，要盖过光束。
2． 抬器样品臂，把比色皿查入到仪器中，插入比色皿时要注意仪器上面的 光路的指向的方向。
3． 在做比色皿检测时样品臂必须放下来。 4． 使用电脑上的软件对仪器进行初始话。
5． 当检测完成后，移出比色皿，倒出样品，清洗干净比色皿。
空白对照和吸收光计算
当Nanodrop 2000/2000C分光光度计做好空白对照后，仪器会自动记录空白参照 液的光谱结果并保存起来作为波长的光强度参比值。当进行样品检测时，透过样 品的光强度将被记录下来。样品的透过光强度和空白对照的透过光强度按下列公 式来计算样品吸光值：
这样，可以通过样本和空白对照的透过光强度来计算特定波长下的吸光值。 通过Beer－Lamber定律来确定样品浓度和吸光值之间的关系：
A＝吸光值（A）
ε＝波长依赖的摩尔消光系数（单位 L/mol*cm） b＝光程（单位 cm）
c＝样品浓度（单位 mol/L）
参比溶液，或者空白溶液，通常是那些融解靶向分子的溶剂，这个溶剂要和样品 溶液具有相同的pH值和离子强度。
基座检测空白循环
我们建议把空白对照当成样品来检测，这样可以确认仪器性能完好并且基座上没 有样品残留，按下列操作来运行空白循环：
1．软件中打开将进行的操作模式，把空白对照加到基座上，并把样品臂放下。 2．点击Blank来进行空白对照检测并保存参比图谱。
3．重新加空白对照到基座上，把它当成样品一样来检测，点击Measure来进行 检测，结果应该是差不多为一水平线，吸光值变化应不超过0.04A（10mm光
程）
4．擦去上下基座上的液体，重生进行上面的操作，直到检测光谱图的变化不超 过0.04A（10mm光程）。
虽然不需要在每个样品之间进行空白校准，但我们建议在检测多个样品时，最好 每30min进行一次空白校准。30min后，最后一次做空白检测的时间将显示在软 件下面的状态栏上。 荧光染料
在进行Micro Array 和Protein & Labels检测时，软件使用Beer－Lambert定律来进 行荧光染料计算。用户可以使用Dye/Chrom来编写新的新的染料。下表是软件中 保存的染料的参数：
2．软件
电脑配置
Microsoft Windows XP或者Vista（32bit）操作系统 1.5GHz或者更高速的处理器 CD ROM光驱
1GB或者更高的内存（Vista系统需要2GB） 40MB硬盘空间
具有USB端口（仪器通过USB与电脑连接）
软件安装
系统软件必须在仪器连接到电脑上之前安装好，安装软件时必须使用管理员用户 进入电脑。按下列步骤来正确的安装软件： 1．关闭所有程序，并把USB线拔出。
2．把软件光盘插入到驱动器中，软件的安装menu会自动显示，如果安装不能自 动开始，点击Start并选择Run。在Run对话框，输入 x:\\Set-up，这里的“x” 代表电脑的光驱，点击OK.
3．按照屏幕提示来进行操作来安装软件，然后连接USB线。如果出现“发现新 硬件提示”，Windows XP SP2操作系统将询问是否需要通过Internet来寻找合 适的软件，选择—No，not this time，然后自动进行软件安装。
这时NanoDrop 2000/2000c分光光度计就可以使用了。如果软件不能打开，参考 “Diagnostics and Troubleshooting”来寻找解决办法。 可以在NanoDrop公司的网站上及时下载软件更新。
Thermo软件安装资质
Thermo软件的安装资质程序执行NanoDrop 2000/2000c软件的安装资质。安装资 质检验安装的是否是正确的软件，并可用来检验这些文件在安装时是否被修改， 删除或者覆盖。
运行Thermo软件安装资质程序： 1．选择桌面Start打开Start menu。
2．选择All programs>Thermo>Thermo Software IQ。 3．按照操作提示来认证您系统软件的安装。
4．使用Help菜单进入 Thermo IQ User Guide PDF.