发布时间 : 星期六 文章OMG植物RNA提取试剂盒使用说明更新完毕开始阅读769bcc754431b90d6c85c7e3
OMG植物RNA提取试剂盒使用说明
1、液氮研磨，取100mg粉末至2ml离心管中，添加500ul Buffer RB/β-巯基乙醇。样品解冻之前加β-巯基乙醇，快速混匀，并保证无块状。
注意： 每1ml RB Buffer中添加20ul β-巯基乙醇，混匀使用，混合液室温可以保存1周。
2、室温14,000g离心5min。
3、上清（大概可以得到450ul）转入含2ml收集管的gDNA Filter Colum中，室温14,000g离心2min。
4、加1/2体积无水乙醇于收集管中，并上下颠倒5-10次混匀。
5、将从步骤四得到的全部混合物包括沉淀置于HiBind? RNA Mini Colum，加一个新的2 mL收集管。室温10,000g离心1min。除去流动相，并把柱子放回收集管中。
6、加400 ul RWC Wash Buffer置于柱子中，室温10,000g离心1min。除去流动相，柱子放回收集管中。
注意： 此时可选择DNase I处理步骤。
7、把柱子放在一个新的2ml收集管上，加500ul RNA Wash Buffer II（用乙醇稀释过的），室温10,000g离心1min，除去流动相，柱子放回收集管。
注意：R6827-01，添加48ml无水乙醇于RNA Wash Buffer II的瓶中，并混匀后使用。
8、重复步骤7，然后把柱子放回收集管中，室温10,000g离心2min，空离干燥。 9、RNA洗脱：把柱子置于新的1.5ml离心管上，加30-50ul DEPC水洗脱，确保水加在柱子中膜的正中央，室温静置2min，然后10,000g离心1min，1.5ml离心管中获得的液体即为RNA。