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第一章: 养心菜的药学研究进展
养心菜，又名费菜，土三七，吐血草等，来源主要为景天科植物费菜(Sedum aizoon L。)和横根费菜(Sedum kamtschaticum Fisch。)的根及全草。前者在我国广为分布，后者主要分布于我国北方的河北，山西，内蒙古等地[43]。品种考证最早出自《救荒本草》[44]，《植物名实图考》也将其作为土三七品种之一加以描述[43]。功类三七，故名景天三七，土三七，见血散[43]。我国各地药物书籍还有记其异名为:八仙草，血山草，马三七，白三七，胡椒七，晒不干，见血散，活血丹，墙头三七，回生草，七叶草，九头三七等。各地植物志上，原植物费菜(Sedum aizoon L。)还有称作六月淋，收丹皮，石菜兰，九莲花，长生景天，细叶费菜，乳毛土三七，多花景天三七，还阳草，金不换，豆瓣还阳，六月还阳，汉三七等，横根费菜(Sedum kamtschaticum Fisch。)还有称作堪察加景天，石板菜，黄菜子，金不换，北景天等[71]。其中费菜(Sedum aizoon L。)为景天三七的主流药材，在全国许多省份都有流通销售，横根费菜，又名堪察加景天，只在少数地区自产自销，产量较少[43]。费菜作为地方药物被江苏省中药材标准所收载[45]。
近年来，费菜作为一种新兴的保健蔬菜得到人们的重视和推广，并有制养心茶和费菜汁，酿酒，烤胶[46，47]等加工利用。据网上资料显示，费菜及横根费菜在欧洲，俄罗斯及远东地区，日本，韩国都有栽培及分布，主要作为园艺花卉植物，而费菜在日本和韩国有一定民间药用，我国部分粗加工产品外销日本等地。但景天三七的深加工及药物开发尚处起步，其系统的功效及成分研究尚不多见，本文对景天三七的药学研究进行综述，为景天三七进一步研究的开展提供参考。
1 临床及民间使用
景天三七味甘，微酸，性平，归心，肝经，有散瘀止血，宁心安神，解毒等功效[71]。临床常用于治疗多种病症:
1．1 止血活血:具有良好的止血效果，主治吐血，衄血，咯血，便血，尿血，崩漏等。尤其对各类咯血症状有显著疗效，并对紫斑，外伤出血，跌打损伤有一定疗效[43]。1971年报道三七糖浆，鲜汁与针剂对白血病，再障，血小板减少性紫癜，支气管扩张咯血，肺结合咯血，消化道出血等疾患的出血有效，并认为它有升血小板作用，可用于各种血小板减少症状并可外用止血[48]。用新鲜叶片滤汁治疗肺癌患者大咯血，鼻衄血20例，出血均一次根治，不再复发[49]。
1．2 养血安神:临床上用于治疗神经衰弱，失眠，烦燥不安等，多与其它药物配伍使用[43]。
1．3 解毒消肿:用于疮疔痈肿，虫蝎咬伤，烫火伤及妇女白带等。刘云[50]报道了他用民间验方\\\景天三七鲜叶捣烂外敷\\\治疗蜂螫五十例，均获痊愈，认为有良好的解毒消肿，止痛作用。郑长宏报道[51]鲜景天三七捣烂后，用醋或酒精调敷治疗患病不同时间的急性单纯性关节扭伤180例，获得良好效果。
1．4 防治心脏病，降血压:在浙江，福建等地称其为养心菜，长期作为菜蔬及药物用来防治心血管疾病，林金水报道了民间使用治疗风湿性心脏病的病例，并认为其除可防治心脏病，对老年人的血管硬化，高血脂，高血压等病症也有缓解作用，并提供了用鲜全草炖猪心治癔病的方子[52]。陈伟超报道了几年来采用景天三七鲜草治疗老年性中风，中风患者服药后可在24小时至48小时内恢复知觉，认为本品有明显的促进血液循环，化瘀压降作用[53]。有人解释为费菜味酸，性平，酸能滋阴养血，故能治心血耗损的心悸怔忡(心律失常，阵发性心动过速);酸还能入肝，养
肝阴，性平不燥，所以有平肝潜阳治疗高血压的功效。并举例蜂蜜水调服鲜费菜治高血压，心烦面红者的处方[54]。
1．5 其它用途:民间认为可强壮身体，治疗虚弱等[43]。 2 药理学研究
1974年国外药理研究翻译报道，费菜的浸剂在对家兔和蛙进行的试验中，有加速血液凝固，收缩血管和兴奋心脏的作用，费菜的提取液还有镇静和降压作用，并能减低苯丙胺的毒性和扩张冠状动脉血管的作用[55]。
以费菜制得的景天三七注射液(水提醇沉法制得)，景天三七白色结晶注射液(可能为有机酸)给小鼠(腹腔)，兔(静脉)注射，可使血凝时间(毛细管法)缩短27%和54%，糖浆给兔灌胃也能缩短血凝时间(60%)及出血时间(37%)[56]。 3 生药学研究
3．1原植物形态
费菜在地理分布上从北到南跨幅极大，饶广远指出费菜在这属植物中形态变异最大，特别是在叶形，叶齿和茎有无分枝上，都是适应不同生存环境的结果，认为植物在喜好的环境下常能长出腋生枝条，茎的生长点遭破坏也会分枝所以他将多花景天(Sedum floriferum)和兴安景天(Sedum hsinganicum)都作为费菜的异名处理[57]。谢宗万在论著[58]中讲述土三七的品种时，包括了费菜和横根费菜，并以两者的原植物作了比较描述，差别主要体现在是否常绿过冬，根茎形态，叶形，花色及有无花梗，果色及地理分布上。
3．2显微组织
乌克兰学者IL\\'YINS\\'KA 对景天属的费菜(Sedum aizoon L。)，横根费菜(Sedum kamtschaticum Fisch。)及Sedum hybridum L。的茎和叶作了解剖学的研究报道[59]，认为解剖学上的差别和外形上的差别息息相关，前两者在解剖学特征上更相似，第三种更独立，这一观察支持了它们现存的分类学上的位置，作者还描述了每一种不同于其它的特征，其中费菜叶表皮有变型异细胞(amoebic idioblasts)，在叶肉细胞，茎的基本皮层组织及中柱中央均无含鞣质的细胞;横根费菜的叶中，叶肉细胞，上皮细胞珠状加厚的垂周壁均略有差别，茎表皮所有的细胞均含鞣质。程艳芹等人[60]对采自湖北神农架林区的费菜进行了形态组织学研究，描述了药材性状特征，并对根，根茎，叶和花的组织构造以及解离组织和粉末特征进行了研究。郑艳[61]在对12种安徽产的景天属植物的花粉作的电镜观察，发现费菜的花粉立体形状为近球形，赤道观为宽椭圆形，极面观为深三裂三解形。花粉粒大小为13。36(13。36-13。70)×12。73(12。06-13。24)um。 P/E值为1。05。三孔沟，角萌发孔，沟中央较两端宽，沟边缘粗厚，孔呈云雾状，内孔不规则。外壁两层，内，外层约等厚，厚度3。15um，表面具清晰的条网纹饰。韩国的Kim Jeong Hee[62]也对包括费菜在内的20种景天属的花粉进行了电镜观察，认为该属花粉变化很大，在不同种甚至在同一标本的同一花序上，萌发孔的数目和形态及表面饰纹都可能有多种类型存在。郑艳在对景天属植物叶表皮进行电镜研究[63]的过程中，认为景天属的叶表皮气孔为不等细胞型，气孔大小，气孔器分布特征，气孔密度，表皮毛等种间差异较大;费菜气孔长25。42μm，宽5。42μm ，长宽比4。69，分布特征是多个聚集成群，中脉处几无气孔分布，气孔分布密度为47。78/μm2，气孔指数0。20。
3．3鉴别研究
丁毅等人[64]采用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳方法，分别测定了费菜和轮叶景天不同营养器官的同工酶谱，并根据电泳后所显示的酶带数计算出品种间的相似性系数，分析同为景天科的两种植物存在的差异及原因，结果表明:造成这种差异的
根本原因在于两种植物基因间的差异。
药材上，吴维春报道费菜曾在东北一些地区作为高山红景天的混淆品种植使用，并作植物和药材的形态比较，认为种子从外观上不易区别，但植物形态上差异很大，药材性状上主要是粗细及分枝多少的不同[65]。鲍锋海等人在对内蒙古赤峰地产柴胡的原植物的调查及鉴定过程中，发现有以费菜根系掺伪的现象[66]。
3．4栽培及组织培养
1987年，芮和恺等人[67]就以MS为基本培养基，加BA 2mg/l，NAA 0。2mg/l诱导愈伤组织和芽分化，以费菜嫩叶产生愈伤组织，最后形成完整植株。罗林会等人也以去叶后只带一个节的嫩枝茎段，诱导芽后生成小苗的方法，实现了离体快速繁殖[68]。安铁生报道，景天三七野生转家种栽培技术及开发研究通过鉴定，并通过对不同部位，不同扦插期，不同基质，不同生长激素的处理，后又对生长密度，肥料，不同采收期和加工方法的试验，得到了4个高产品种及总结出整套栽培加工技术[69]。 4 化学成分
krasnov 1971年发现费菜根含齐墩果酸，β-谷甾醇，熊果酸和熊果苷[43]，1973年用光谱法对景天属的一些植物中的熊果苷作了测定[70]。费菜的地上部分中含有葡萄糖，果糖，蔗糖和2种7碳糖，并且用同位素观察其中芳香物质生成过程中发现景天庚糖，并认为可能含生物碱[55]。Krasnov于1977年对景天属中生物碱作了研究，发现了费菜中有消旋-甲基异石榴皮碱，左旋景天宁和消旋景天胺[71]。Gnedkov 对景天科一些种类包括费菜的化学成份比较时，发现Sedum属的10个种中有柠檬酸，苹果酸，琥珀酸和酢浆草酸，并有槲皮酮和Kaempferol[72]。Revina对生长在托木斯克的景天属植物生物特性和化学成份研究发现包括费菜在内的三种植物地上和地下部分均含复杂酚类成分，有机酸和多元酚的含量在开花时最高[73]。1996年波兰学者Maria W对费菜的地上部分的多元酚成份作了系统研究，从分离出没食子酸，没食子酸甲酯，槲皮酮，槲皮苷，杨梅黄酮，杨梅苷和新的酰化黄酮类成分: 槲皮酮-3-(2\\'\\'-没食子酰基)鼠李糖甙。以化学和光谱的方法测定了这些化合物的结构。并对香豆素和酚酸类成份作了色谱研究[74]。
横根费菜中，Zapesvchnaya 发现了杨梅素-3-葡萄糖苷，杨梅素-3-半乳糖苷，杨梅素-3-O-β-D-(6\\\没食子酰基)-葡萄糖苷和杨梅素-3-O-β-D-(6\\\没食子酰基)-半乳糖苷[43]。 Gill Stanislaw发现其中有熊果苷和氢醌[75]。 Kim\\'Jeong Hee等人对亚洲景天属包括横根费菜在内的三个组植物叶的生物碱进行研究，在横根费菜叶中未发现生物碱[76]。
此外，Shnyakina对十六种Sedum属中酚性成分检测，发现杨梅酮及苷和槲皮苷是包括两者在内的Aizoon组的优势成分[77]。
此外，费菜每百克嫩茎叶含水分87g，蛋白质2。1g，脂肪0。7g，碳水化合物8g，热量196。65千焦耳，粗纤维1。5g，灰分1。2g，钙315mg，磷39mg，铁3。2mg，胡萝卜素2。54mg，维生素B10。05mg，维生素B20。07mg，维生素PP0。9mg，维生素C90mg。尤其含钙量很高，因此费菜嫩茎叶作菜有一定的营养价值[82]。 5 制剂及质量标准研究
宋金斌等人通过景天三七栽培品和野生品比较热空气杀青后干燥，自然干燥，硫黄熏蒸后干燥以及热水浸烫后干燥等加工方法，以药材样品的水溶性浸出物，醇溶性浸出物，总生物碱及薄层色谱等的分析比较，认为相同加工方法的栽培品和野生品药材质量无显著差，扩大了可用药源，但不同加工方法对质量有一定影响，并认为不宜用硫黄熏蒸和热水浸烫杀青的方法[73]。 陈华珍等以芦丁为对照品，用分
光光度法分别测定了费菜中不同器官中的总黄酮含量，结论是含量高低依次为:老叶，嫩叶，花和茎;并用聚酰胺片对药材中槲皮素进行了薄层层析的鉴别[72]。
费菜作为药材收入江苏省中药材标准。制剂有景天三七糖浆及养心片。景天三七糖浆曾收载于77版药典一部，现部颁标准中收载，为单味景天三七带根全草的糖浆制剂，以没食子酸为对照品，氯仿:醋酸乙酯:甲醇:甲酸(2:1:0。6:0。7)为展开剂进行薄层鉴别。养心片为景天三七为主，加上枸杞子，珍珠母，蜂皇浆的提取浸膏压制的片剂，收入浙江省药品标准。郭素华以槲皮素为对照品，用分光光度法对自制养心菜胶囊进行了总黄酮的含量测定，检测波长430nm，样品经70%乙醇回流提取，正丁醇萃取，定容，显色后测定。槲皮素标准曲线线性范围1～12μg，相关系数r为0。998，加样回收率为98。58%，并用正交设计，研究养心菜的最佳工艺条件[31]。
景天三七是一个药食两用的药物，在民间有很广泛的应用基础，它对心血管方面的作用近些年在民间被普遍注意，并被认为可以降血脂和降血压，在现在心血管类疾病日趋增加的今天，这个过去被认为是止血良药的草药，开发其成为心血管方面的药物以及其它保健类产品，具有良好的市场前景。本文综述为进一步研究景天三七提供依据。希望此文能抛砖引玉，兴起更多对它的观注和研究，使其能为造福人类作出新的贡献。
第二章:养心菜中槲皮素成分的HPLC-MS/MS分析
养心菜，国内研究尚无其有效成分的相关报道，国外文献中，从波兰产的同种植物中分离出含槲皮素等的黄酮类成分和其它酚酸类成分。槲皮素具有多种生理活性。其中降低血压，增强毛细血管抵抗力，减少毛细血管脆性，降血脂，扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等活性，对冠心病及高血压患者有辅助治疗作用。为了进一步开发养心菜的药用价值，选取控制质量的指标性成分，为了确定闽产养心菜中是否含有槲皮素，我们采用柱色谱分离，高效液相色谱-质谱法进行验证。 养心菜中槲皮素成分的分析
1 仪器与试剂 仪器:
Waters LC-MS/MS分析仪；
旋转蒸发仪(RE52-99DLSB5/2型) 上海亚荣生化仪器厂 药品与试剂
槲皮素对照品(中国药品生物制品检定所，批号0081-9304)
养心菜(福建连城兰花公司提供，经本院中药鉴定教研室车苏容老师鉴定，品种定为Sedum aizoon L。)
甲醇为色谱纯;石油醚，乙酸乙酯，乙醇等试剂均是分析纯。 2 实验方法
2。1液相色谱条件：
色谱柱:Symmetry，2。1mm×150mm，3μm； 流动相:0。1%甲酸，乙腈，梯度洗脱。 2．2质谱条件:
仪器:Quattro Premier三重四级杆串联谱仪；
电离方式:ESI选项性正离子检测；
扫描方式:Full Scan，Daughter Scan(全程扫描，子离子扫描) 2。3 供试品溶液的制备
将养心菜药材剪碎用95%乙醇回流1。5h/次，两次。合并浓缩，烘干硅胶伴样装硅胶柱，石油醚和乙酸乙酯梯度洗脱得到石油醚:乙酸乙酯(5:5)部分过聚酰胺柱，