发布时间 : 星期二 文章寄生虫标本的采集和保存 - 常正山更新完毕开始阅读8127a1ae25c52cc58ad6be24
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中国寄生虫学与寄生虫病杂志２００６年１２月第２４卷增刊ＣｈｉｎＪＰａｒａｓｉｔｏｌＰａｒａｓｉｔＤｉｓＤｅｃ．２００６，Ｖｏｌ．２４，Ｓｕｐｐｌ
集此种标本比较方便，收集粪便标本最好用特制的粪便盒或油纸，如果使用便盆则必须洗涤干净，不要用消毒剂洗涤，不要使尿或水混入粪便或容器内，以免杀死滋养体。采取粪便务求新鲜。标本收集后，最好及时处理，以免滋养体死亡变形。室温低於１５℃时应注意保温，以便涂制标本观察虫体活动，若当时不能立即进行涂片观察，可将粪便暂放置４℃冰箱中，待进行观察或制片时再加温（３７℃）使虫体活动，但放置于冰箱的时间不宜超过４ｈ。
定氏固定液固定，再移置于７０％乙醇内保存，供日后染色制片、长期保存［４］。
３．５３．５．１
组织内原虫标本
组织内原虫主要为利什曼原虫和弓形虫。杜氏利什曼原虫
该虫生活史中有两个时期，
寄生于白蛉消化道内或２２￣２８℃人工培养基中，虫体前端有一根游离的鞭毛称为前鞭毛体，通称为鞭毛体期。寄生于人和哺乳动物的内脏巨噬细胞内，无游离的鞭毛，称为无鞭毛体，通称为利杜体期。利杜体在外周血液内很难发现，故取材时应选择巨噬细胞丰富、利什曼原虫多、穿刺安全、操作简便的器官进行。常用的方法是脊突或骼骨穿刺。方法是取骨髓穿刺液制成薄膜涂片，有时因取出的穿刺液较少，只好用穿刺针在载玻片上尽量涂抹均匀，在空气中晾干，用甲醇固定。
如穿刺液很少，不易检出时，除经过培养增殖后进行诊断外，还可将待检患者的穿刺液接种于田鼠腹腔，１￣２个月后，取其肝、脾作涂片或印片检查，也可将肝、脾用研钵磨碎，加入适量生理盐水和血液（鼠、兔及其他动物血液，加抗凝剂）稀释后，再涂制血片薄膜，待自然干燥后用甲醇固定。将以上用甲醇固定的涂片经吉氏染液染色后干燥保存即可。
３．３．２固定与保存当采到含有肠原虫新鲜标本时，
无论是滋养体还是包囊，应立即制成涂片标本，用肖定氏固定液固定，再移置于７０％乙醇内保存，以备日后染色制片观察。
肠原虫滋养体在体外容易死亡分解，应趁新鲜及时涂片固定，包囊除了涂制玻片标本染色外，亦可保存于５％甲醛生理盐水中。保存方法：将含有原虫包囊较多的粪便用５％甲醛生理盐水调成悬液，经６０目孔铜筛过滤于尖底量筒中，静置３￣４ｈ后，倾去上清液，再换以新的５％甲醛生理盐倒入瓶中保存。检查时，用吸管吸取此混悬液一滴置于载玻片上，复以盖玻片高倍镜检。如需染色检查时，可加入碘液１滴与粪液相混后检查。此法可保持包囊形态较长时间不变［８］。
３．５．２弓形虫该虫寄生于单核白细胞、网状内皮细
３．４腔道内原虫标本
３．４．１采集腔道内原虫主要为阴道毛滴虫、齿龈内
阿米巴及口腔毛滴虫。
阴道毛滴虫：寄生于妇女的阴道内，尤以后窟穹窿为多，故标本应选在妇产科门诊部采集。采集前应备好一定数量的消毒棉花拭子和培养基，并请妇产科医师协助。将收集的阴道分泌物接种于培养基内经培养使该原虫繁殖后涂制标本易检出。亦可采取少量标本，不经培养直接涂片镜检，但检出率较低。
齿龈内阿米巴与口腔毛滴虫：可在牙科门诊采集。两种原虫均寄生于口腔内，定居于齿龈组织、齿垢、蛀穴及齿槽脓疡内。采集时用牙签或小尖镊子挑取牙龈周围污垢物质，加一滴生理盐水于载玻片上调和均匀，置显微镜下检查。如标本虫数太少，通过人工培养法使虫体繁殖后涂制镜检，可提高检出率。
胞、神经细胞和其他组织细胞内，但有时也可游离于体液中。采集方法：取急性患者的体液、脑脊液经离心沉淀，取沉渣作涂片，干燥后用甲醇固定。当虫体较少时，可将待检体液或组织磨碎，加适量无菌生理盐水稀释或制成混悬液，注射于小白鼠腹腔内，约经过１￣３周，取腹腔渗出液或小白鼠肝、脾、脑磨碎制成厚膜涂片，待自然干燥后用甲醇固定。涂片经吉氏染液染色干燥后保存［５］。
３．６医学昆虫标本
传播疟疾与利氏曼病的蚊与白蛉等成虫通常用针
插好晾干，存放于昆虫盒内保存，盒内应放樟脑块以防虫蛀。蚊、白蛉、蝇等昆虫的卵、幼虫和蛹，以及蚤、虱、臭虫、蜱、螨等的发育各期均应保存于７０％乙醇中。需要分离病原的昆虫常不作任何处理，收集于干净的试管或小瓶中保存［４］。
３．４．２固定与保存
阴道毛滴虫：取阴道分泌物在玻片上涂成薄膜，
４寄生虫标本的包装和邮寄
在现场采集的蠕虫、原虫、昆虫标本及血清标
在空气中晾干，用甲醇固定后，即可短期保存，如用吉氏染液染色３０￣６０ｍｉｎ，水洗晾干后即可长期保存。
齿龈内阿米巴与口腔毛滴虫：取患者牙龈周围污垢物质加一小滴生理盐水和血清于载玻片中央调和均匀，使成一圆形薄膜，平置待尚未干燥而湿润时用肖本，基层防疫单位无法完成病原鉴定或血清学检测的，应及时包装邮寄或派专人运送至上级有关检疫部门进行检测。需邮寄时，按以下方法进行包装处理后邮寄。中国寄生虫学与寄生虫病杂志２００６年１２月第２４卷增刊ＣｈｉｎＪＰａｒａｓｉｔｏｌＰａｒａｓｉｔＤｉｓＤｅｃ．２００６，Ｖｏｌ．２４，Ｓｕｐｐｌ
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凡用乙醇或甲醛等固定液固定的标本应用棉花填塞空间，以免液体流动损坏标本，瓶口也可用石蜡封固。昆虫的针插标本必须牢固地插在指形管的软木塞上，或插于昆虫盒内，昆虫盒外面用塑料袋包裹防潮。如果干燥昆虫标本不用针插，可放在适当的瓶内，瓶底铺几层软纸，放入标本后，标本上的空间要用软纸填塞，以免标本因震荡而损坏，最后将瓶塞塞紧，瓶口用石蜡封固。各种寄生虫的玻片标本应放在玻片盒中，上下用纸充填固定。如无玻片盒应在玻片两端用火柴杆或厚纸片隔开，再用纸包好扎紧，放木盒中。
血清免疫学检测采集血液标本可不必空腹采血，常用的方法是采２ｍｌ血凝固后分离到１００￣２００!ｌ血清，然后吸入带盖的洁净小塑料管，置放入盛有干冰或冰块的保温杯中，装在用填充料塞紧的邮寄纸箱中。如采集静脉血有困难，可耳垂采血４￣５滴盛于小塑料指形管中待血凝固后，分离出２￣３!ｌ的血清，同上法包装邮寄。一般查一种寄生虫的血清量不得少于２￣３!ｌ。
邮寄时，将上述盛标本的瓶或盒放入木盒中，标本瓶（盒）周围用碎纸或塑料泡沫条棉花等塞紧，以免损坏［２］。
参
考
文
献
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固定和保（缪峰，刘永春，赵长磊．现场调查寄生虫标本的收集、
存方法［Ｊ］．中国寄生虫学与寄生虫病杂志，２００２，２０：３７９．）
编辑：盛慧锋）（收稿日期：２００６－１１－１０
【消息】ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｎｎｏｕｎｃｅｍｅｎｔｏｆｔｈｅ７ｔｈＲＮＡＳ＋Ｗｏｒｋｓｈｏｐ
Ｔｈｅ７ｔｈＲＮＡＳ＋ＷｏｒｋｓｈｏｐｗｉｌｌｂｅｈｅｌｄｉｎＬｉｊｉａｎｇ，Ｙｕｎ－
ｎａｎｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａｏｎ５－７Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ２００７，ｗｈｉｃｈｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙＵＮＩＣＥＦ／ＷｏｒｌｄＢａｎｋ／ＵＮＤＰ／ＷＨＯＳｐｅｃｉａｌＰｒｏｇｒａｍｍｅｏｎＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＴｒａｉｎｉｎｇｉｎＴｒｏｐｉｃａｌＤｉｓｅａｓｅｓ，ＤＢＬ－ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＨｅａｌｔｈＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｄｅｎｍａｒｋ，ａｎｄＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｃｈｉｎａ．Ｔｈｅｍｅ：
ＲｅｖｉｅｗｉｎｇｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆＲＮＡＳ＋，ｒｅｖｉｓｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｏｎｐｌａｎｆｏｒｒｅｓｅａｒｃｈ，ｔｒａｉｎｉｎｇ，ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａ－ｓｉｓ，ａｎｄａｄｄｒｅｓｓｉｎｇｔｈｅｓｔａｔｕｓｏｆｔｈｅｏｔｈｅｒｉｍｐｏｒｔａｎｔｚｏｏｎｏｔｉｃｈｅｌｍｉｎｔｈｅｓ．Ｖｅｎｕｅ：
ＬｉｊｉａｎｇＷａｎｇｆｕＨｏｔｅｌ
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Ｔｈｅｗｏｒｋｓｈｏｐｗｉｌｌｂｅｔａｋｅｐｌａｃｅｆｒｏｍ５ｔｏ７Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ２００７．Ａｌｌｐａｒｔｉｃｉｐａｎｔｓａｒｅｗｅｌｃｏｍｅｔｏａｒｒｉｖｅｂｅｆｏｒｅｏｒｏｎ４Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ２００７．Ｃｏｎｔａｃｔｐｅｒｓｏｎ：
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