发布时间 : 星期一 文章2017年高中生物第2章基因工程第3节蛋白质工程（第2课时）学案苏教版3 - 图文更新完毕开始阅读9a5a85f1370cba1aa8114431b90d6c85ec3a8801
第2课时 动物细胞融合和单克隆抗体
1．掌握动物细胞融合的原理、方法、过程与意义。 2．掌握制备单克隆抗体的方法、过程和应用。(重、难点)
动 物 细 胞 融 合
1．含义：在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。 2．结果：形成杂种细胞，如鼠－鸡杂种细胞。 3．促融方法
(1)物理法：如离心、振荡、电场法。 (2)化学法：如聚乙二醇作为诱导剂。 (3)生物法：如仙台病毒作为诱导剂。 4．应用：制备单克隆抗体。
[合作探讨]
科学家经过长期的探索，终于实现了让不同种动物的体细胞进行杂交的设想，观察下图，图中有多个A细胞和B细胞。
探讨1：动物细胞融合的结构基础是什么？ 提示：细胞膜的流动性。
探讨2：若只考虑两两融合，则诱导细胞融合后可能形成几种融合细胞？融合后的细胞在遗传上有何特点？
提示：①三种融合细胞，即同种细胞融合(两种)和不同种细胞融合(一种)。②特点：具有两个细胞的遗传信息。
探讨3：经促融处理后的细胞是否均需进一步筛选？
提示：是。促融处理后，均会出现不同种融合细胞，所以需要对处理后的细胞进行筛选，
1
选择出符合要求的杂交细胞。
探讨4：动物细胞完成融合的标志是什么？
提示：动物细胞融合时，先是细胞膜发生融合，然后是细胞核的融合。当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞，则标志着动物细胞融合的完成。
探讨5：比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。
提示：二者都可以采用离心、振动、电场法等物理方法，或者使用化学试剂聚乙二醇进行促融，除上述方法外，动物细胞融合还可以采用灭活的病毒进行促融。
[思维升华] 1．动物细胞融合 (1)操作步骤：
??贴壁：直接将两亲本细胞混合培养
细胞准备?
?悬浮：制成一定浓度的细胞悬液?
↓
细胞融合：加促融因子于待融合的细胞之中，诱导融合 ↓
杂种细胞选择：利用选择性培养基等，使亲本细胞死亡，而让杂种细胞存活 ↓
杂种细胞克隆：对选出的杂种细胞进行克隆，经过培养，就能获得所需要的细胞 (2)过程分析：
细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞
核融合，其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性。
2．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 原理 融合前 处理
植物体细胞杂交 细胞膜的流动性、细胞的全能性 先除去细胞壁 动物细胞融合 细胞膜的流动性、细胞的增殖 先使细胞分散开 2
使用的酶 诱导手段 纤维素酶和果胶酶 物理法：离心、电场法、振动 化学法：聚乙二醇等试剂诱导 胰蛋白酶 除物理法和化学法外，也可用灭活的病毒诱导 过程 结果 应用 意义 杂种植株 培育植物新品种 杂交细胞 主要用于制备单克隆抗体 克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合
1．近几年神舟飞船频频成功发射和着陆。在飞船上，科学家进行了无人搭载的空间动物细胞融合实验。该实验所依据的原理和促进动物细胞融合时最常用的方法分别是( )
A．细胞的全能性、灭活的仙台病毒诱导融合 B．细胞的全能性、电场法融合
C．细胞膜的流动性、灭活仙台病毒诱导融合 D．细胞膜的流动性、电场法融合
【解析】 不管是动物细胞融合，还是原生质体融合，都是利用了细胞膜具有流动性这一原理。动物细胞融合时最常用的诱导手段就是利用灭活的仙台病毒诱导。
【答案】 C
3
2．下图所示为细胞融合技术的一些过程：
(1)从A细胞和B细胞到C细胞的过程中，采用的方法中与诱导植物原生质体融合不同的是________处理。
(2)若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了________。这种酶可能是________、________，由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为________。
(3)若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是_______________________________________________
_______________________________________________。
(4)若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄细胞融合，由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是____________。
(5)若A、B分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则D细胞的特点是__________________。由D细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有__________________的特点。
(6)若将染色体组成为2A＋XX的人细胞与染色体组成为2B＋XX的鼠细胞融合，培育成的人－鼠细胞的染色体组成是________。
【解析】 (1)动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。(2)植物细胞有细胞壁，若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用纤维素酶和果胶酶脱掉了细胞壁；植物体细胞杂交获得的杂种细胞，经脱分化形成愈伤组织。(3)A是基因型为Hhrr的烟草的花粉，故其基因型为Hr、hr，B是基因型为hhRr的烟草的花粉，故其基因型为hR、hr，因此经细胞融合可能形成的融合细胞有：HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr、HhRr，共6种。分析这6种细胞的基因型可知，除HhRr之外均有一对隐性纯合基因(rr或hh)，即在光照强度大于800 lx时都不能生长，因此获取基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是给予大于800 lx的光照。(4)、(6)细胞融合后的染色体或基因分别是两种细胞的染色体或基因累加。(5)A、B分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则D细胞为杂交瘤细胞，其特点是既能无限繁殖，又能产生特定的抗体。产生的抗体为单克隆抗体，同血清抗体相比，它具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
【答案】 (1)灭活的病毒
(2)细胞壁 纤维素酶 果胶酶 愈伤组织 (3)给予大于800 lx的光照
4