发布时间 : 星期六 文章BSL2ABSL-2生物安全实验室病毒实验室-培训知识点更新完毕开始阅读9c3bd8f9492fb4daa58da0116c175f0e7dd1196a
保存与使用
感染性物质应贮存于指定的冰箱，冰箱门应张贴生物危险标识。
感染性物质的监管实行双人负责制，由实验室负责人和其指定的责任人共同管理。保藏冰柜实行双锁管理。每次存取感染性物质必须登记。
感染性物质的所有操作必须在Ⅱ级生物安全柜中进行。开放式的工作台上不允许操作这类物质。 所有涉及感染性物质的使用过程都应如实记录，包括领取和使用的时间，感染性物质名称及数量。不经实验室负责人批准，不得将感染性物质带出实验室。
实验工作结束后，未用尽的感染性物质和使用后得到的产物应按要求进行处理、销毁或保存，并如实填写实验记录。
实验室内空气的消毒和灭菌
实验室房间、生物安全柜、传递窗内的悬吊式紫外消毒灯等对上述空间内的空气进行消毒，安装数量为平均1.5W/m3，照射时间30-60分钟。
甲醛熏蒸可对实验室空气、设备以及物体表面的微生物实现有效灭菌。 二氧化氯喷雾可对实验室空气、设备以及物体表面的微物实现有效消毒灭菌。 物体表面消毒灭菌
实验室地面应湿式拖扫，禁止干拖干扫和使用吸尘器。可使用含氯消毒液（有效氯含量1000-2000mg/L）喷洒后拖扫。拖把应专用，污染区和清洁区不得混用。应使用可装配吸水布或纸巾的拖把，使用后用应将吸水布或纸巾作为感染性废物处理。
实验台面、桌子、椅子、凳子、门把手、实验记录夹等可用75%乙醇喷洒擦拭，消毒作用不少于20min。 实验材料的表面可用75%乙醇擦拭或喷洒消毒。 仪器设备的消毒灭菌
显微镜、离心机、冰箱、培养箱、移液器等局部轻度污染时，可用先后用2%戊二醛和75%乙醇擦拭。污染严重或传染性强的，半小时后重复擦拭一次。如需整体灭菌，应使用甲醛熏蒸或二氧化氯喷雾。 手的清洁消毒
离开BSL-2实验室污染区，脱防护服前应75%乙醇洗手消毒。
实验室工作完毕后应立即进行手部清洗和消毒。采用非自动洗手设备，水龙头开关尽量应用长柄式、脚踏式或感应式。使用瓶装式液体皂，洗手后用一次性纸巾或烘干机烘干。在无流动水情况下，可使用含乙醇免洗消毒洗手液。 废弃物处置程序 分类收集
实验室废物应根据其特性分别按照感染性废物、病理性废物、
损伤性废物(锐器)、化学性废物进行分类收集。危险废物应使用专用容器收集。在设有分区的实验室中，不同区域的废物应分开收集。实验废物应收集于所在区域的废弃收集容器内。感染性实验废物应使用专用黄色包装袋收集，包装袋应置于专用硬质收集箱桶里。
BSL-2实验室防护区中产生的实验废物均应视为感染性废物。
核心工作间中可使用红色高压灭菌袋收集。生物安全柜中产生的废物应在生物安全柜内消毒、收集、包装后移出。损伤性废物（锐器）应使用有盖、耐刺破的黄色利器盒收集，并按感染性材料处置。感染性液态废物应收集于实验室内的可密闭收集桶中，禁止直接向下水管道中排放。收集容器内实验废物超过容量3/4时必须进行清理。实验废物应每天至少清运一次。 消毒灭菌
感染性废物的消毒灭菌方式包括：化学消毒、高压灭菌、高温焚烧。 感染性废物收集前应先进行化学消毒。
-2实验室感染性废物送出实验室前应高压灭菌。如实验室不具备高压灭菌条件，可送至清洁室高压
灭菌。实验废物送出BSL-2实验室前应消毒包装袋外表面。 任何需重复使用的感染性材料必须在消毒灭菌后进行清洗、修复。
-2实验室使用过的防护服、毛巾应高压灭菌后再送出洗涤。
-2实验室产生的含有感染性物质的液态废物应使用消毒剂处理后集中收集于密闭容器。移出实验室前应使用含氯消毒剂处理。处理时间应不少于2小时，有效氯含量应大于2000mg/L，处理过程中容器应保持密封。BSL-2实验室废液移出实验室前应对容器外表面进行化学消毒
离心准备工作要求 检查转头或离心杯密封圈 离心管内液体不应过量 密闭离心管
离心管放入转头或离心杯前应去除表面污染 密闭转头或离心杯
去除转头或离心杯表面污染 使用纯水或酒精作为配平液体 应在用于配平的离心管盖上作标记 离心结束后的工作要求
在生物安全柜内打开转头或离心杯
从生物安全柜内取出转头或离心杯时应去除污染
生物安全柜 操作规程
个人防护要求（在使用生物安全柜时必须穿个人防护服，戴手 套；应戴口罩和帽子，根据需要带防护眼罩或者面罩。）
柜内物品的摆放按照从洁净区到污染区的方向摆放。所有物品尽可能放在工作台后部。将废物袋、移液管收集盘、吸滤瓶等大体积物品放在柜内一侧。 前后格栅不能被纸、仪器设备或者其他物品阻挡。
紫外消毒灯 每周清洁，除去可能影响杀菌效果的灰尘和污垢。房间中有人时一定要关闭紫外灯，以保护眼睛和皮肤，避免因不慎暴露而造成伤害。
避免明火 火焰可造成生物安全柜的气流紊乱，干扰气流模式。可损坏HEPA过滤器。处理挥发性物品和易燃物品时易造成危险。
工作前准备
打开安全柜的日光灯和风机；安全柜运行15min，净化工作区的空气污染物；用适当消毒剂擦拭生物安全柜的工作台面及内壁以去除污染；将实验中需使用的物品集中用消毒剂擦拭后放在台面相应位置上。
工作中操作
避免手臂在前开口处快速移动和频繁进出。尽量避免污染的物品进入洁净区。在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作。尽量减少操作者身后的人员活动。操作者的面部应始终在移动档板后面。
溢出处理
始终保持生物安全柜运转状态，不要关闭风机。在溢出物上覆盖浸有消毒剂的吸水材料，保持适当时间以 发挥消毒作用。在安全柜内消毒污染的手套。如果防护服已被污染，也应消毒。更换新的手套和衣服后进行下一步的清洁工作。所有废弃物以及防护服进行高压灭菌。清洗手部和其它部位暴露皮肤。立即通知实
验室相关管理人员。如果溢出物流入安全柜内，可能需要对安全柜进行彻底消毒。 工作结束后处理
保持安全柜继续运行至少5min完成净化。将柜内物品移出前，应使用适当消毒剂擦拭去除表面污染。工作结束后应使用适当消毒剂擦拭生物安全柜的内壁和台面，以去除污染。关闭前窗，关日光灯，关风机，开紫外消毒灯照射至少30分钟。
实验动物微生物和寄生虫控制分级 一、分级：
1、普通级动物（CV）
概念：普通级动物是指饲养在开放系统中，在微生物控制上要求最低的动物，它要求不携带人畜共患病和动物烈性传染病的病原。
特点：①来源于清洁动物或SPF动物，在开放系统中饲养。饲养成本低，价格便宜，可大量供应。②微生物控制程度低，但应排除人畜共患病和动物烈性传染病。③对实验反应性差。 2、清洁动物(CL)
概念：除不带有普通级动物应排除的病原外，还不应携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。 特点：①来源于SPF动物或无菌动物，在屏障系统中饲养。②较普通级动物健康，又比SPF动物容易达到质量标准。③对实验干扰较少，实验重复性和敏感性较好，是我国主要的科研用动物。 3、无特定病原体动物(SPF)
概念：无特定病原体动物是指动物体内无特定的微生物和寄生虫存在，但带有非特定的微生物和寄生虫的动物。
特点：①来源于无菌动物或悉生动物，饲养在屏障系统中。②属健康无病动物。繁殖率高，自然死亡率低。③不干扰科研实验，实验结果可靠，是国际上公认的科研用动物。 4、无菌动物(GF) 包括悉生动物(GN)
概念：无菌动物是指用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。 特点：①来源于剖腹产或无菌卵的孵化，饲养在隔离系统中。②体内外无菌，饲养较困难。③形态学和生理学在某些方面与常规动物不同。 5、悉生动物(GN)
概念：悉生动物是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物。植入一种细菌的动物叫单菌动物；植入两种细菌的动物叫双菌动物；植入三种细菌的动物叫三菌动物；植入多种细菌的动物叫多菌动物
特点：①来源于无菌动物，对动物所带的微生物明确。饲养在隔离系统中。②与无菌动物相比，生活力、抵抗力较强，容易饲养。③在某些实验中，可代替无菌动物。
实验动物常见疾病
鼠痘（脱脚病）、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎、小鼠肝炎、仙台病毒、沙门氏菌感染、霉形体感染、螨病 动物实验中的生物危害
生物危害是指在科学实验中，由于实验人员的错误操作，而使有害病原体散播到外界，污染外界环境，并造成周围人及动物感染发病。 第一类：天花病毒
第二类：鼠疫耶尔森菌，霍乱弧菌，布鲁氏菌属，炭疽芽胞杆菌，乙型脑炎病毒 第三类：金黄色葡萄球菌，链球菌属，仙台病毒（鼠副流感病毒1 型） 第四类：小鼠白血病病毒，小鼠乳腺瘤病毒
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小鼠标记
( 1) 3- 5％苦味酸溶液，可染成黄色。——作为“个”位数。 ( 2) 0.5%中性红或品红溶液，可染成红色。——作为“十”位数。
二、在任何事情上都不要觉得自己受了多大的委屈，哭哭啼啼和别别扭扭改变不了糟糕的现状。心子开一点，认真地该干啥干啥，反倒走得顺畅许多。扛得住多少东西，最后就会得到多少东西，大致就是这么个理儿吧。 3 6 9 三、生命本没有意义，你要能给他什么意义，他就有什么意义。与其终日冥想人生有何意义，不如试用此生做点有意义的事。 四、爱怕沉默。太多的人，以为爱到深处是无言。其实，爱是很难描述的一种情感，需要详尽的表达和传递。 五、有些路，只能一个人走。 六、有一种落差是，你配不上自己的野心，也辜负了所受的苦难。 七、有些决定，只需要一分钟，可是，却会用一辈子，去后悔那一分钟。 八、“忽然想通了”,这五个字说来简单，要做到可真不容易。我佛如来在菩堤树下得道，就因为他“忽然想通了”.达摩祖师面壁十八年，才总算“忽然想通了”.无论什么事，你只要能“忽然想通了”,你就不会有烦恼，但达到这地步之前，你一定已不知道有过多少烦恼。 九、如果他总为别人撑伞，你何苦非为他等在雨中。 十、我对前任的感觉很简单，哪怕他的女朋友来我面前秀恩爱，我也不会觉得烦。就像在看别人吃一碗很香的卤肉饭，吧唧嘴巴弄得很大声，但我自己心里是明白的：我吃过那种饭，其实没那么好吃。 十一、为什么我们总是不懂得珍惜眼前人？在未可预知的重逢里，我们以为总会重逢，总会有缘再会，总以为有机会说一声对不起，却从没想过每一次挥手道别，都可能是诀别，每一声叹息，都可能是人间最后的一声叹息。 十二、我在最好的时候碰到你，是我的运气。可惜我没时间了。想想，说人生无悔，都是赌气的话。人生若无悔，那该多无趣啊。我心里有过你。可我也只能到喜欢为止了。 十三、我说不出来为什么爱你，但我知道，你就是我不爱别人的理由。 十四、当你在转圈的时候，这个世界很大，当你勇往直前，这个世界就很小。 十五、现在男女之间的恋爱，总是答应太快，结果分手也快。人性的规律是容易得到的就容易放弃。凡是通过努力得到的，不管是感情还是物品，都会使人顿生珍惜之感。所以在感情上，当