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第四章微生物的营养
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(1)从苯含量较高的环境中采集土样或水样；(2)配制培养基，制备平板，一种仅以苯作为唯一碳源(A) ，另一种不含任何碳源作为对照(B) ；(3)将样品适当稀释(10倍稀释法)，涂布A平板；(4)将平板置于适当温度条件下培养，观察是否有菌落产生；(5)将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板，置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气中CO2的自养型微生物)；(6)挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落，在一个新的A平板上划线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物；(7)将初步确定的目标菌株转接至以苯作为唯一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵实验，利用相应化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的情况。
3.某些微生物对生长因子的需求具有较高的专一性，可利用它们通过“微生物分析”(microbiological assay)对样品中维生素或氨基酸进行定量。试设计实验利用某微生物对某一样品维生素B12的含量进行分析。
(1)将缺乏维生素B12但含有过量其他营养物质的培养基分装于一系列试管，分别定量接入用于测定的微生物；(2)在这些试管中分别补加不同量的维生素B12标准样品及待测样品，在适宜条件下培养；(3)以微生物生长量(如测定OD600)值对标准样品的量作图，获得标准曲线；(4)测定含待测样品试管中微生物生长量，对照标准曲线，计算待测样品中维生素B12的含量。
第五章微生物的代谢
1.胃八叠球菌和运动发酵单胞菌产生乙醇的方式有什么不同？ 胃八叠球菌通过EMP途径产生乙醇，类似于酵母菌中；而运动发酵单胞菌则通过ED途径产生乙醇。两者的代谢途径不一样。
2．光合细菌有哪几类?细菌的光合作用与绿色植物的光合作用之间有什么不同? 光合细菌分为不产氧和产氧两个类群，其中不产氧光合细菌包括紫色细菌、绿色细菌及阳光细菌；蓝细菌等依靠叶绿素进行非循环光合磷酸化式的光合作用，与绿色植物一样，但不产氧；光合细菌包括紫色细菌、绿色细菌及阳光细菌依靠菌绿素进行循环光合磷酸化式的光合作用。
3.请解释为什么CO2不能作为能源?当它作为电子受体时，接受电子后通常会转换成什么物质?
CO2中的碳原子的化合价为+4，为最高氧化态，不能再进行氧化产生能量；当得到电子后，经过卡尔文循环生成[CH2O]n化合物。
4．与高等动、植物相比，微生物代谢的多样性表现在哪些方面?
微生物代谢的多样性表现在代谢类型的多样性，可以从对底物利用、能量产生以及代谢产物等方面进行理解。微生物可以利用不同的化合物如有机物和无机物进行生长，而通常以糖作为其最适生长碳源。微生物能以不同代谢途径分解葡萄糖及其他糖，对葡萄糖的糖酵解除了具有动、植物一般的代谢途径如EMP途径、HM途径外，还有一些独特的途径如ED途径、PK途径或HK途径等；微生物能量产生的多样性，如光合磷酸化、底物水平磷酸化、氧化磷酸化等；微生物代谢产物的多样性，如乙醇发酵、乳酸发酵、丙酮-丁醇发酵、混合酸发酵。微生物还有一些独特的代谢类型，如生物固氮、沼气发酵等。
5.如何利用代谢调控理论提高微生物发酵产物的产量? 利用代谢调控理论提高微生物发酵产物产量，常采用的手段包括：利用营养缺陷型、结构类似物抗性突变株、营养缺陷型和结构类似物抗性突变株、改变细胞膜的通透性等措施。
1.酵母突变株的糖酵解途径中，从乙醛到乙醇的路径被阻断，它不能在无氧条件下的葡萄糖平板上生长，但可在有氧条件下的葡萄糖平板上存活。试解释这一现象。
酵母突变株的糖酵解途径中，从乙醛到乙醇的路径被阻断，在厌氧条件下，产生的还原力NADH，用于还原磷酸羟基丙酮生成磷酸甘油，进而水解成甘油，当甘油达到一定浓度，能够抑制菌体生长。在有氧条件下，糖酵解途径中产生的还原力NADH的电子传递给氧，而生成的NAD+能够继续接受电子，使得反应循环进行下去，故表现酵母菌在葡萄糖平板上存活。
2.论述不同微生物在不同条件下，丙酮酸的去向。 微生物糖酵解的中间产物是丙酮酸，在有氧条件下，经过TCA循环，进行好氧呼吸，丙酮酸彻底氧化，产生CO2和大量能量；当有氧化型化合物时，可进行厌氧呼吸，并通