发布时间 : 星期日 文章基因工程一轮复习教学案(教师版)更新完毕开始阅读9f8089c303020740be1e650e52ea551811a6c934
基因工程
知识点1：基因工程概念理解
别名 基因拼接技术或DNA重组技术、转基因技术 操作环境 生物体外 操作对象 DNA（基因） 操作水平 分子水平 原理 基因重组 过程 －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 优点 定向改造生物的遗传性状（目的性强）、克服远缘杂交不亲和的障碍 【典例1】下列叙述符合基因工程概念的是(B) A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 思考：基因工程成功的原因？
a、DNA相同的分子组成和空间结构
b、密码的通用性，都遵寻中心法则（碱基互补配对原则）
知识点2：基因工程（DNA重组技术）的基本工具
1、限制性核酸内切酶（限制酶）－“分子手术刀”
来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（酵母菌中也有） 功能：识别双链ＤＮＡ分子中特定的核苷酸序列，并在特定位点切割 结果：粘性末端或平末端（图例说明）
在基因工程中何时使用：在获取目的基因时、构建基因表达载体时
【典例２】下列关于限制酶的说法不正确的是（ ）
Ａ、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 Ｂ、限制酶可用于提取目的基因
Ｃ、不同的限制酶切割DNA的切点一般不同 Ｄ、限制酶广泛存在于动植物及微生物中
【典例３】已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生不同的DNA片段种类数是（C ）
A. 3 B. 4 C. 9 D. 12 2、DNA连接酶－“分子缝合针”
功能：恢复被限制酶切开的磷酸二酯键
种类：E.coli DNA连接酶－连接粘性末端 T4DNA连接酶－连接平端（效率低）
注意：限制酶、DNA连接酶、DNA（水解）酶、DNA聚合酶之间的区别。
【典例４】据图所示，有关工具酶功能的叙述错误的是（D ）
A．限制性核酸内切酶可以切断a处 B．DNA聚合酶可以连接a处
C．解旋酶可以使b处解开 D．DNA连接酶可以连接c处 3、运载体－“分子运输车” 种类：质粒（最常用）、噬菌体（衍生物）、动植物病毒。
具备的条件：a、能在宿主细胞内稳定存在并大量复制（不影响宿主本身） b、有１个或多个限制酶的切点 c、有标记基因
注：①携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA同步复制。
②在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒基础上进行人工改造的。
末
【典例５】质粒之所以能做基因工程的运载体，是由于它（B ）
A、含有蛋白质，从而能完成生命活动 B、能够自我复制，从而保持连续性 C、是RNA，能够知道蛋白质合成 D、具有环装结构，能够携带目的基因 【典例６】下列各项中，a、b、c、d代表的结构正确的是（D）
A．a——质粒RNA B．b——DNA连接酶 C．c——限制性内切酶 D．d——外源基因
知识点３：基因工程的操作步骤
1、获取目的基因
目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因
方法：从基因文库中获取（针对序列未知的，从自然界中已有的物种中分离出来） PCR技术扩增（将已有的基因进行扩增）
通过人工方法化学合成（有反转录法和直接化学合成法） 注意：①基因组文库和cDNA文库的区别
②从基因组文库中获取－用限制酶切割、分离；（此时限制酶在目的基因前后各要切割一次）