发布时间 : 星期三 文章溶菌酶综合型实验报告(很全面很详细)更新完毕开始阅读9fc7eba903768e9951e79b89680203d8cf2f6af5
用与水可混溶的有机溶剂，甲醇，乙醇或丙酮，可使多数蛋白质溶解度降低并析出， 此法分辨力比盐析高，但蛋白质较易变性，应在低温下进行。 1.2.2根据蛋白质分子大小的差别的分离方法 1.221 透析与超滤
透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。
超滤法是利用高压力或离心力，强使水和其他小的溶质分子通过半透膜，而蛋白质留在 膜上，可选择不同孔径的膜截留不同分子量的蛋白质。 1.2.2.2 凝胶过滤法
也称分子排阻层析或分子筛层析，这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方 法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝胶(Sephadex gel)和琼脂糖凝胶(agarose gel )。 1.2.3根据蛋白质带电性质进行分离
蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同，可将其分开。 1.2.3.1 电泳法
各种蛋白质在同一 pH条件下，因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同 而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳，这是利用一种两性电解质作为载体，电泳时 两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的
pH梯度，当带一定电荷的蛋白质在其中
泳动时，到达各自等电点的pH位臵就停止，此法可用于分析和制备各种蛋白质。 1.2.3.2 离子交换层析法
离子交换剂有阳离子交换剂(如：羧甲基纤维素；
CM纤维素)和阴离子交换剂(二乙
氨基乙基纤维素；DEAE?FONT FACE宋体\纤维素)，当被分离的蛋白质 溶液流经离子交换层析柱时，带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂 上，随后用改变pH或离子强度办法将吸附的蛋白质洗脱下来。 1.2.4根据配体特异性的分离方法-亲和色谱法
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