发布时间 : 星期四 文章病理科制度及管理规范-二类医疗技术申报附件更新完毕开始阅读cdc64239bb68a98271fefa6b
代清楚。骨组织和需钙化的组织应进行脱钙处理。
7. 有下列情况之一者，应编写小序号号码并与相应的组织块放在一起，切勿放错：①一位病员被送一件以上的标本。②申请单中注明有特殊标记的标本。③一个大标本多处取材。④根治术标本的基部及切缘，找出或送检的淋巴结。⑤补充取材。
8. 每件标本取材后，应用流水冲洗，纱布擦试取材台及用具，必须清理干净后再取下一例标本，防止标本间的组织碎屑污染，造成误诊。取材结束后，病理医师应向技术人员当面交付组织块；技术人员点清块数，取材者和记录者应分别在记录单的适当位置签名。技术人员检查病理医师为技术室所提供的材料是否合格：组织块数的确认、标本大小、厚度、脱钙情况、特殊固定等，清点后接收——交接班。
9. 所用的器械用戊二醛消毒溶液浸泡消毒，工作台面和取材板，用0.2～0.4%过氧乙酸溶液擦拭消毒，此外可用紫外线对取材室进行空气和物体表面消毒。室内用紫外线消毒时应清洁、干燥，温度不低于20℃，相对湿度不超过50%，一般照射20～30分钟。 三、组织处理、包埋程序及质量控制
组织固定、脱水、透明、浸蜡直至包埋，是制作优质切片的关键过程。该过程也称为组织处理。一旦组织处理有欠缺，往往导致无法挽回的后果。
固定后的组织通常经过一系列的梯度乙醇脱水，也可使用乙醇和福尔马林混合液，或使用其它脱水剂。大多数脱水剂不能与石蜡直接相溶，所以脱水后必须再经过透明剂作用，才能对组织进行浸蜡。最后用石蜡包埋组织块。
透明剂作用于组织的过程，称为组织透明。最常用的透明剂是二甲苯。组织经过二甲苯透明后，浸泡在熔化的石蜡中，组织浸蜡一般要通过2～3个蜡缸，最终以石蜡替换出组织中的透明剂。石蜡的熔点一般为56～58℃，浸蜡的温度通常比蜡的熔点高2℃左右。
上述组织处理过程一般由脱水机自动处理。组织在脱水机中按照预先设置的时间和温度程序自动完成。
组织处理的质量控制：
1. 组织的处理时间，视组织的性质和组织块的大小而有所不同。致密的组织、富含脂肪或纤维组织，处理所需的时间要比结构细腻、细胞成分多的组织长。最好能根据组织的性质和大小分类，分批进行处理，以便于掌握时间，保证质量。
2. 较细小的组织，例如内窥镜钳取标本，穿刺标本，应与较大的组织块分别进行处理。小组织滤纸包裹或者装入专用的网状脱水盒内，以免遗失。
3. 组织处理所用的各种试剂，可根据工作量的大小，试剂消耗情况定时更换新液。一般情况下一月更换一次。在实际工作应用中其效果以保证常规切片的质量为原则。科室有相对固定的脱水及浸蜡程序，如有工作人员需要对固定的脱水、浸蜡时间程序改动，先提交申请，申明改动的理由及改进原理，经科主任批准后，可以开始批量试验。在新程序不成熟以前，不准日常工作应用！待批量结果实验以后，经全科工作人员对此进行评估，决定应用与否。如违背此规定，擅自改动者，为第一责任人，出现差错者应受相应的处分。
工作中自动脱水机使用时的注意事项： 1. 按脱水、透明、浸蜡顺序设置程序及时间。
13
2. 保持各试剂缸内的试剂液面有足够的高度，以使组织全部侵入液体内。 3. 按设计好的组织处理时间表，调定时间控制装置。 4. 调定浸蜡缸温度，一般要高出所用石蜡熔点温度2℃左右。
5. 当完成最后一道程序后，应及时取出标本进行包埋（必要时随手关机）。 组织包埋程序
1. 包埋剂及其使用范围：用于组织包埋的材料有石蜡、碳蜡、火棉胶和各种塑料等。石蜡是最常用的组织包埋剂。石蜡包埋是一种常规包埋法，组织从脱水机中取出后仍在脱水盒内，必须人工将组织从脱水盒中取出来，然后放进包埋框里排列整齐，调整好方位，再灌满熔化的石蜡。
2. 包埋步骤：
（1）包埋时的用蜡需预先熔化，充分沉淀后使用。
（2）将熔蜡注入蜡模内，将镊子在酒精灯上加温，夹持浸好蜡的组织块，选择好包埋面，将其朝下埋入熔蜡内，用镊子轻轻按压，使组织在蜡中并紧贴蜡模底部。随即将组织块号码签嵌入熔蜡的一侧。
（3）待熔蜡表面凝固后，可投入流水中、放进冰箱冷冻室或包埋机冷台上促凝。 （4）待蜡完全凝固后脱模，并把蜡块四周适当修切。组织周围应留有1~2mm的蜡边。提倡使用石蜡包埋机，质量更好！
3. 包埋面的选择：
（1）一般情况下以组织最大面为包埋面。 （2）管状结构的组织以横切面为包埋面。
（3）皮肤组织或有表层上皮的组织，包埋面应垂直于上皮表面。
（4）带有病变特点的组织，或者对包埋面有特别要求的组织应按预先标记的包埋。 组织处理、包埋程序的质量控制：
1. 取材后对固定不充分的组织，应补充固定（固定时间：大标本固定时间不得少于18小时；小标本不得少于6小时。固定液必须定时更换（标本固定时间过长者，应流水冲洗）；应将大、小标本分开固定、脱水。
2. 固定、脱水温度不得高于37℃。 3. 试剂必须定时更换。
4. 包埋用石蜡必须定期过滤，蜡温应控制在62℃左右。
5. 包埋时应严格分块包埋，并同时包入相应的小号，切勿包错。不得将来历不明的碎组织块任意包入，以防污染。
6. 组织包埋完成后必须进行清点蜡块数量，以防组织块在脱水、包埋过程中遗失。 四、 组织切片程序及质量控制
石蜡切片程序：
组织包埋后必须切成薄片，再贴到载玻片上。需使用的设备：切片机、切片刀、水浴锅或捞烤片机等。切片机多轮转式石蜡切片机。切片刀为一次性的刀片。组织切片是一门精细的技术，需要花费一定的时间练习，才能熟练掌握这门技术。
14
石蜡切片质量控制：
1. 切片前首先装好切片刀，把刀牢牢固定，否则，切片中就会发生许多人为现象。（最常见的人为现象是波纹，厚薄不均等）。
2. 蜡块装到切片机的蜡块夹上，夹持要平稳牢固。调整好蜡块的方位，不能偏斜，刀刃与蜡块的上、下缘平行。切片刀与蜡块的平面之间应保持一定的角度，以免刀刃面将组织刮坏。
3. 修蜡块时要循序渐进，力争修出最大面，又要防止小组织被修坏、修光。 4. 切片时连续转动手轮，用力要平稳、均匀。常规切片厚3～5μm。
5. 切下的蜡片相连成带状。待蜡带切至一定长度时，右手用镊子夹住蜡片末端，左手持毛笔轻轻将蜡带的另一端与切片刀拨离。
6. 将蜡片较光滑的一面朝下置于温水中（通常捞片水温在42℃左右），并用镊子帮助展开，去除皱纹后，选择完整、无划痕、厚薄均匀的蜡片，附贴到载玻片上。
7. 附贴时，务使蜡片与玻片之间无气泡。玻片一端应留有1/3的位置贴号码标签用。将蜡片附贴在另外2/3的中心位置。
8. 切片放入62℃烤箱中约30～60分钟烤片，以免发生脱片。免疫组化染色需使用打胶片（APES胶片和多聚赖氨酸胶片等）。
冷冻切片程序:
在手术过程中，外科大夫为了明确手术切除标本的性质及病变。通常送新鲜组织做冷冻切片病理检查，由病理医师在短时间内（一般30分钟左右）做出病理诊断。外科医生根据病理诊断，决定手术切除范围。冷冻切片需要一台具有冷冻功能的切片机。
冷冻切片质量控制：
1. 选取适当的新鲜组织块，放在冷冻托上，放入冷冻切片机中冻透。 2. 修块、切片。冷冻切片通常厚6～8μm并把切片贴于载玻片上。 3. 切片放入固定液中2分钟。 4. 然后快速HE染色。
5. 封片、贴标签后，送诊断室（20分钟之内完成）。 HE染色程序及注意事项：
1. 组织经过石蜡包埋切片后，因含蜡的切片无法进行染色，必须反向脱去切片上组织中的蜡，让水溶性染料渗入切片中。所以在染色前必须用二甲苯或替换剂进行彻底脱蜡，然后用乙醇洗，最后再用水洗。
2. 染色注意事项：
a) 配制染液和其他溶液时，要根据需要和染液的保存期限决定配制数量。
b) 需要保存再用的染液和试剂，必须贴上标签，注明名称、浓度、配制日期和用处等，妥善存放。经常使用的染液和试剂要经常过滤或更换新液。
c) 染色器皿须洗涤干净。必要时用酸洗液处理。将玻璃器皿浸泡于酸洗液中半天至1天，自来水冲洗数小时，再用洗涤剂刷洗，自来水冲洗数小时，蒸馏水冲洗后备用。
染色是利用染料的不同作用，使组织与染料以不同方式进行结合。常规染色是苏木精
15
和伊红染色（简称HE染色）。特殊染色是根据诊断的需要对组织中的某些成分进行非常规的染色。冷冻切片也用HE染色。少量或单个冷冻切片时手工操作比较方便。冷冻切片染染色要求在短时间（10～15分钟）内完成，在保证质量的前提下越快越好。
切片质量控制：
1. 诊断人员在接到当日切片并验收后，检查、核实所制作的组织学切片的数量及质量，在技术室送片记录本或工作流程单上签字。如发现切片数与取材数不符，应及时与技术人员联系，进行核查。对当天质量不好的切片做记录，指明技术上存在的缺陷，并于当天交技术室。
2. 技术室收到切片质量记录，要求在24小时内答复，并立即纠正原不足之处。另外，科内质量管理小组按分工，每月按时间顺序复查切片一次，查出问题要采取适当措施于以纠正，并注意落实情况。
3. 切片是技术含量很高的步骤，同一蜡块，用同一台切片机，同一把刀，不同的操作者会切出不同质量的片子。所以要求：切片刀必须锋利；切片厚度3～5μm，切片完整，无污染，无皱褶，无刀痕。组织片应贴附在标签外，剩余玻片的中间。
4. 胃镜、纤维支气管镜、穿刺等小活检组织切片须作连续性切片，数量不得少于6张（6～20张）。
5. 切片、捞片时应严格分块完成，切忌在水面上残留上一块的碎片，以杜绝污染。 6. 贴（裱）片时，必须注意蜡块编号与载玻片上的编号完全一致，杜绝错误。 7. 切好的白片要进行烤片化蜡。烤片温度应在60～62℃左右，时间不能少于20分钟。 8. 染色必须按程序操作，染色试剂必须及时过虑或更换。HE染色适中，核、浆分化对比清晰，避免过红或过蓝（注意防止苏木素渣子和伊红碎片出现）。
9. 切片封固前必须经酒精充分脱水，二甲苯透明，湿封。不得用温箱烤干或电吹风吹得过分干燥，再封片。
10. 盖玻片使用前必须清洗。（真空包装除外）。封片时不得有气泡，不得有树胶外溢。 11. 标签贴于玻片一侧，编号字迹必须清楚、整齐，且不易褪色，有条件者尽量采用打印（即不干胶标签）。
12. 染好切片后贴标签时，编号要与玻片编号一致，杜绝错误。
13. 制片工作一般应在12～24小时内完成。切片完成后交付医师时，必须按照记录当面清点（实行交接班签字手续 ）。
镜下观察切片质量控制：
1. 切片内有明显污染组织，应与技术人员联系，并共同检查、处理。
2. 切片内容与送检组织不符，应分别与技术人员和取材者联系，必要时要与送检科室联系。
3. 切片或染色质量差，应与技术人员联系，提醒改进工作，必要时重新制片。 4. 为充分观察病变需做深切、连续切、特染、免疫组化等，应在申请单备注栏或工作流程单上写出意见、项目并签名，交付技术室有关人员。
5. 实行初、中、高三级医师阅片把关责任制，逐级复查，避免差错及误、漏诊。
16