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指纹图谱简介或研究现状
指纹图谱简介或研究现状
1.前言：
中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，但现行的显微鉴别、理化鉴别和含量测定等方法都不足以解决这一问题，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。这也正好符合中医药整体学说。在此基础上，如果进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于阐明中药作用机理。总之，中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。
2.指纹图谱简介：
中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。在此基础上，如果进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于阐明中药作用机理。总之，中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。
中药指纹图谱的研究以反映中药的整体化学特征为立论依据，提出以解决两个关键技术为突破口，实现指纹图谱技术在中药质量控制方面的应用。它的特色主要表现在三个方面：
用规范化的程序获得中药特征性总成分提取物，并用1HNMR、HPLC、UV、IR等多种手段表征其组成和结构。不同的表征手段间的区别主要表现在所得到的信息多少不同和操作上的方便程度不同。同此，核心的问题在于这种特征性总成分提取物要有真正的特征性，它的组成和结构要能真正代表这种中药。
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由于同时采用多种检测手段来表征中药特征总提物的结构和相对组成方式，因此，方便了各部门在质量控制方面可以根据自己的实际情况选择应用。其中，由于1HNMR具有操作简便、快速、检测成本低、重现性好和信息量大等优点，更是中药指纹图谱研究的主要特色之一。
中药指纹图谱的解析研究以及中药特征总提物和各单体成分的生理活性研究体现了这一技术的科学性。
中药指纹图谱的研究将近代分离手段和仪器分析技术应用于中药的质量控制，目的在于建立一种新的质量控制方法，因此，是一种具有创新性的研究工作。另外，每种中药指纹图谱的建立和对其进行的解析也均具有显著的创新性。
3.研究现状：
3.1.光谱：光谱技术是近20年来出现并迅速发展起来的一种新兴的现代科学技术，已逐渐成为中药材真伪鉴别及其质量评价的重要参考手段之一。它是建立在物质对光的吸收、发射基础上的检验技术，早已广泛应用于有机化合物分子的结构鉴定以及中药有效成分的定性、定量分析。
3.2.uv指纹图谱：uv法具有灵敏、简便、准确等优点，可反映不同化学物质的电子共轭体系特征，具有加和性，但对混合物的鉴别专属性差、分辨率低，故很少用于指纹图谱的构建。
3.3.IR指纹图谱：是对整个化合物分子的鉴别，比对单纯的官能团化学定性鉴别专一性更强。在IR指纹图谱中，不用将混合物的IR各主要吸收峰归属，只需在4000～400cnl范围内比较光谱的差异即可。既可用于中药材的鉴别，如甘草I、延胡索与全叶延胡索、粉葛与野葛1等药材的鉴别；还可用于成药的鉴别，如田进国等?对同仁乌鸡白凤丸与消栓再造丸的IR指纹图谱进行了研究，结果两种样品都具有独特而稳定的IR指纹图谱，可作为质量控制和真伪鉴别的依据。
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3.4.NMR指纹图谱：从纯有机化合物的核磁共振氢谱上可获得结构信息，包括各类质子的化学位移、数量核偶合关系。采用阿一NMR波谱仪对不同来源天麻及其伪品的乙醇提取物的’HNMR指纹图谱进行测定，发现80．80—1．22区、82．6—5．3区、86．6—7．35区3个区域有共振峰分布，可以作为鉴别天麻的特征峰，而伪品在86．6—7．35区均未出现天麻的特征共振峰1。
3.5.MS指纹图谱：将中药提取液置质谱仪中进行电子轰击电离，可获得提取液中化学成分的El～MS图，不同中药提取液所含成分不同，所得质谱显示的分子离子峰及进一步的裂解碎片也不一致，可资鉴别。天麻主要化学成分为对羟苯甲醇衍生物，天麻甲醇提取物的EI—MS指纹图谱特征性强，而作为商业用天麻伪品的植物却均不含对羟基苯甲醇衍生物，故其EI—MS图与真品有显著区别I。
3.6.TLC指纹图谱：常用于中药中各种成分的鉴定，具有适用范围广、重现性好等特点。已建立的高良姜中黄酮类成分的薄层色谱指纹图谱，可有效鉴别其质量nol。
3.7.高效薄层色谱指纹图谱：谢培山等?对Panax属西洋参、三七进行了薄层色谱图像分析，获得的薄层色谱荧光彩色图像可以在同板上形象地比较各个样品的异同。
3.8.HPLC指纹图谱：具有分离效能高、分析速度快等优点，近期已普及应用于中药的定量分析。陈斌等应用反相高效液相色谱法对不同产地掌叶大黄药材进行了指纹图谱比较，不仅将大黄中的成分较好地分离，对指纹谱征峰辨认也采用了新的分析系统，该法能较好体现图谱间的相似性，可为药材质量的分析与控制提供可靠的依据。
3.9.GC指纹图谱：是封闭性色谱，受外界影响较少，具有高性能、高选择性、高灵敏度等优点，适合于挥发性药材等的指纹图谱研究，一般使用氢火焰离子化检测器(FID)。苏微微等“对乌鸡白凤丸石油醚提取物进行了气相色谱分析，获得的指纹图谱可作为乌鸡白风丸质量评价的标准。
3.10.HPCE指纹图谱：是以高压电场为驱动、毛细管为分离通道，依据样品中各组分的
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淌度和分配行为上的差异而实现高效快速分离的新型电泳技术。王刚力等“采用该法对18个卷百柏属植物样品的乙酸乙酯提取物进行测定，建立了18个样品的指纹图谱。
3.11.X射线衍射图谱：中药材的x衍射图谱是药材中所含各种成分衍射谱的叠加，从总体上反映一般成分和主要成分的分布概况，从而可能提供较全面的、有鉴别意义的数据。x衍射指纹图谱具有专属性强、信息量大、所需样品量小等诸多优点。吴云山等应用粉末X射线衍射图谱鉴定法对5个白芍的中药材样品进行分析，获得了白芍的标准x射线衍射图谱及特征标记峰值。3．3DNA指纹图谱不同生物体均有各自相对稳定的DNA序列，利用聚合酶链反应(PCR)从不同生物样品中人工合成DNA片断，而这种DNA片断的大小、数目可因不同的生物而异，因此称为DNA指纹图谱法。该技术具有重复性好、灵敏度高的优点。目前应用于中药质量研究的DNA分析技术主要有分子杂交和PCR两种，前者有以低拷贝序列基因为对象的RFLD，及以中度重复序列为对象的卫星DNA指纹图；后者有RAPD，AFLP和测序等。罗志勇等采用RFLP技术分析了人参、西洋参的基因DNA指纹图谱。
4.新动向和发展趋势：
4.1.基因芯片技术：基因芯片将是高通量、高效率地从分子水平上研究中药的最新技术手段。基因芯片也叫DNA芯片，它是运用计算机芯片的制备技术，采用原位合成或显微打印技术，将数以万计的DNA探针化于支持物表面上，产生二维DNA探针陈列，然后与标记样本杂交，通过化学荧光法、酶标法、同位素法或电化学法等方法检测杂交信号来实现对生物品的快速、并行、高效地检测或医学检测。基因芯片技术主要应用于基因表达谱分析、新基因发现、基因突变、多态性分析及检测基因组整体转录表达情况，也为探索中药作用靶点、药物筛选、中药成分鉴定、道地药材鉴别等现代中医研究开辟了新的领域。
4.2分子生物色谱指纹图谱：现代分子生物学的发展，逐步阐明了神经介质酶、受体在生命活动中所起的调节作用。分子生物色谱是把生物体内活性物质(如酶、受体、传输蛋白等)固定于色谱填料中，利用中药中活性成分与其相互作用，将色谱分离与分子生物学二者的新成果紧密结合起来，建立有效成分的指纹分子质量控制方法，并为组合中药的研究提供有效分子的结构信息。由于分子生物色谱以生物活性分子间广谱的相互作用为基础，也可利用其指纹分析法对有效成分尚不清楚的中药进行快速的质量监控。
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