发布时间 : 星期日 文章微生物的实验室培养学案更新完毕开始阅读eb171666b7360b4c2f3f6459
课题1: 微生物的实验室培养（导学案）
高二生物组
目标导引
1、通过学习知道培养基的种类、营养要素及如何配制培养基 2、通过学习知道消毒灭菌的原理和方法
3、通过学习你将知道如何用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养
问题导学
一、培养基:阅读课本培养基的相关内容，完成下列问题：
（1）培养基分为哪两类？二者的区别？培养基有何用途？
（2）不同的微生物所需要的培养基配方相同吗？培养基的基本成分（主要营养物质）有哪些？为什
么大多数培养基都需要具备这些基本成分？
（3）培养基除能为微生物生长提供几种主要营养物质外，培养基还需要满足微生物生长的哪些要求？
（4）你知道牛肉膏、蛋白胨可以为微生物的生长提供哪些营养物质吗？
二、无菌技术：阅读无菌技术的相关内容，完成下列问题：
（1）获得纯净培养物的关键是什么？无菌技术围绕什么而展开？主要包括哪几个方面？
（2）什么是消毒与灭菌？二者的区别？实验室常用的消毒方法、灭菌方法有哪些？分别适用于那些用具？
（3）利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？
（4）请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。
①培养细菌用的培养基与培养皿。 ②玻棒、试管、烧瓶和吸管。 ③实验操作者的双手。
④接种环、接种针和其他金属用具。
⑤接种室、接种箱、超净工作台 ⑥牛奶、啤酒、果酒等
（5）无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？
（6）使用后的培养基丢弃前要怎样处理？为什么？
三、实验操作----大肠杆菌的纯化培养：
（一）阅读课本制备牛肉膏蛋白胨固体培养基相关内容，思考回答以下问题： （1）用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养分哪两个阶段？
（2）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤？
（3）称取牛肉膏和蛋白胨时要注意什么？
（4）在进行溶化的操作时，加入水、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂的顺序是？为什么在琼脂熔化的过程中要不断用玻棒搅拌？
（5）阅读倒平板操作的具体步骤，思考以下问题：
①培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
②为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
③平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
④在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
（二）阅读课本纯化大肠杆菌相关内容，思考回答以下问题：
（1）微生物接种常用的两种方法是？用这两种方法接种的目的是？微生物的接种技术还有哪些？这
些技术的核心是什么？
（2）阅读平板划线法的操作步骤，思考回答以下问题：
①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要燃烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧Ａ．接种前用火焰灼烧接种环 Ｂ．接种前用酒精擦拭双手 接种环吗？为什么？
②在灼烧接种环之后，为什么要等到其冷却后再进行划线？
③在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
（3）阅读系列稀释操作的步骤，思考所使用的移液管需要怎样处理？操作时在哪儿进行？
（4）阅读涂布平板操作的步骤，操作中要注意哪些问题？第2步应如何进行无菌操作？
（5）将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是？
四、分析课题结果，思考回答以下问题： （1）怎样检验你制作的培养基是否合格？
（2）怎样检验你的接种操作是否符合无菌要求？
（3）培养12 h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因。
（4）为什么要进行菌种的保藏？对于频繁使用的菌种可以采用什么方法保藏？这种方法的缺点是？
而对于需要长期保存的菌种可以采用什么方法保存？
课堂基础训练
1、关于微生物的营养，说法正确的是( )
A．是碳源的物质不可能同时是氮源 B．凡碳源都能提供能量 C．除水以外的无机物只提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量 2、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是( )
A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置 3、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是( ) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ 4、下列操作与灭菌无关的是( )
Ｃ．将平板倒置，放入培养箱中培养 Ｄ．接种要在酒精灯的火焰旁完成 5、有关平板划线的正确操作是( )
Ａ．用已灭菌的接种环、培养皿、操作过程中不再杀菌
Ｂ．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后要马上塞上棉塞 Ｃ．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 Ｄ．最后将平板倒置放入培养箱中培养
6、有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( )
Ａ．首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B．适宜条件下培养 Ｃ．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落
课后拓展训练
1、将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱的目的是( ) Ａ．对比观察培养基有没有被微生物利用 Ｂ．对比分析培养基上是否有杂菌 Ｃ．没必要放入未接种的培养基 Ｄ．为了下次接种时再使用
2、金黄色葡萄球菌有很强的致病力，还可能引起食物中毒。下述实验结束后的做法错误的是( )
A．对接种环进行灼烧处理 Ｂ．接种后双手须经肥皂洗净，再用75％的酒精棉球擦拭C．带菌培养基须经加热后才能倒掉 D．带菌培养基须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉 3、高压蒸气灭菌的原理是（ ）
A．高压使细菌DNA变性 B．高压使细菌蛋白质凝固变性 C．高温烫死细菌 D．高温使细菌DNA变性
4、下面为某同学在培养金黄色葡萄球菌实验中的部分操作步骤，其中正确的是（ ） A．培养基中牛肉膏、蛋白胨溶化后直接加入蒸馏水，定容至100 mL
B．用1mol/L NaOH，调节pH为5.0～6.0 C．用高压蒸气灭菌锅对培养基灭菌 Ｄ．将接种环在酒精灯上燃烧后，马上伸入菌液中挑取少量菌种 5、在一定条件下选取大量乳酸菌所需的条件是（ ） A． 在有氧条件下，缺氮的培养基中，最好是固体培养基 B． 在有氧条件下，营养丰富的液体培养基中分离 C． 在无氧条件下，泡菜制作的发酵容器中 D． 在无氧条件下，变酸的葡萄酒中 6、有关倒平板的操作错误的是（ ）
A． 将灭过菌的培养基放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置 7、涂布平板法的说法中错误的是（ ）
A．用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头吹吸三次，目的是使菌液与水充分混匀 B．移液管需经过灭菌
C．试管口与移液管应在离火焰1～2cm处 D．涂布时可转动涂布器，使菌液涂布均匀
8、为保持菌种的纯净，需对菌种合理保藏。下列叙述中错误的是（ ） A.对于频繁使用的菌种，可采用临时保藏的方法 B.临时保藏的菌种,一般是接种到试管斜面培养基上 C.临时保藏的菌种,容易被污染或产物变异
D.对长期保存的菌种,可以采用低温-4℃保藏的方法