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PCR实验室化学试剂配制程序 发布部门:XXXXX医院检验科 分发范围: 检验科PCR室 编写者: XXXX 审核者:XXX 批准者:XXX 文件编号:PCR(N)-SOP-005 版本/修订号: A/0 实施日期: 2012年5月1日
目的：保证实验中用到的各种溶液符合实验要求。
适用范围：核酸扩增荧光检测实验室常用溶液：4%NaOH溶液、75%酒精、2000mg/L有效氯溶液等。 程序： 1
用具：干燥洁净的250ml量桶一只，三角烧瓶，天平一架，100ml试剂瓶。配制步骤： 2.1 配制4%NaOH溶液:
a) 用天平称取4克分析纯的NaOH固体，置于一只三角烧瓶中。
b) 用250ml量桶准确取100ml水，缓缓注入盛放NaOH固体的三角烧瓶中。 c) 摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解。 d) 然后缓缓倾倒入100ml试剂瓶中密封保存备用。
2.2 配制2000mg/L有效氯溶液消毒剂: 本室采用片剂配制有效氯溶液，根据实际配制液体体积
加入适当数量片剂。
2.3 75%酒精溶液: 由医院库房直接领取。
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PCR实验室应急处理程序 发布部门:XXXXXX医院检验科 分发范围: 检验科PCR室 编写者: XXXX
1.目的：在实际工作中，仪器设备发生故障、试剂盒发生质量问题时，为保证检验结果的准确性、
及时，应正确采取应急措施，最大程度上避免或减轻不利影响。
2．适用范围：适用于满足核酸扩增荧光检测实验室检测需要并可能对检验结果造成误差的仪器设备
和试剂盒。 3．负责人： XXXX 4．细则：
4．1 核酸扩增荧光检测实验室工作人员在职责范围内均有责任熟悉各种仪器和相关设备的性能、要
求、维护和保养、常见故障的排除、尤其要严格按照操作规程操作。
4．2 工作人员在职责范围内均有责任有意识地注意以求及时发现并报告仪器设备和试剂盒的异常情
况。
4．3 作为应急处理，潜在着一定的可能影响检测质量的不确定因素。室负责人负责在第一时间检
查核实应急措施的有效性。 4．4 仪器设备故障
4．4．1 室负责人接到异常情况报警后，立即现场确认异常情况的性质：观察有无误操作、偶发
现象或确属不能立即排除的故障。
4．4．2 用红牌故障标志标示故障仪器，以防被错误使用。
4．4．3有满足要求的替用设备的，启用替用设备（准用仪器）。借用其他部门仪器设备时，及时
联系借用并核实该设备的使用状态。替用、借用或备用设备的使用在满足质量要求的同时，必须同时满足实验室管理措施（特别是防污染）的要求。
4．4．4不能解决的问题，应及时与供应方会同解决。根据双方合同约定，及时通知供应方。供应
方技术支持人员将在规定的时间内随身携带备用设备到达现场。
4．4．5仪器维修后，必须经验收合格并供需双方签字，调试实验通过后才能重新启用。取下红色
故障标示（暂停使用），换上绿色正常标示（正常使用）。 4．4．6 室主任须检查并随时跟踪所采取措施的有效性。
审核者:XXX 批准者:XXX 文件编号:PCR(N)-SOP-006 版本/修订号: A/0 实施日期: 2012年5月1日 第 7 页/共 93 页
4．4．7对未能及时排除故障时，必须及时上报科室，在科主任批准下，应积极联系附近的其他已
得到上海市临检中心认证的临床基因扩增检验实验室检验，以满足患者和临床需求。 4．5 试剂盒质量发生问题，经核实后，及时通知供货商迅速更换另一批次试剂，使用前需先作质
量检测，合格后方可使用。
4．6 仪器设备故障或试剂质量问题不能得到解决，预期将会影响到检测报告的及时发出，可将标
本送至其它已得到上海市临检中心认证的临床基因扩增检验实验室检查；如已影响到报告的及时发出，应在门诊取报告处向病人公告或向相关病区公告，取得病人的谅解。 4．7 影响到检测报告发出的情况，应在应急处理记录表作记录。 5 相关表格
应急处理记录表，编号PCR(N)-SOP-006-01。
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PCR实验室试剂质检标准操作程序 发布部门:XXXXXX医院检验科 分发范围: 检验科PCR室 编写者: XXX
1．目的：保证每批用于临床实验的试剂的质量良好，符合要求。 2．适用范围：各种用于临床实验的核酸扩增荧光检测试剂。 3．负责人：XXXX 4．程序：
4．1 收到试剂后，目测试剂是否处在冻存状态。
4．2 核对试剂品种和数量并检查包装：外包装（厂名厂址、批准文号、批号和有效期等）；内包装
（试剂瓶完整性、试剂配备品种完整性、使用说明书有否等）。
4．3 及时将试剂转入－20℃冰箱保存。将上述检测核对情况在记录表上登记。
4．4 最迟在前批次试剂存量尚可维持常规实验一周时，按如下要求对新批号试剂进行效验实验。 4．5 效验实验：
4．5．1 要求设置：空白对照、阴性对照、阳性对照、室内质控各一，阳性标准品梯度（104、105、106、107）。
4．5．2 出现如下情况中任何一种的，判断为试剂不合格，不能用于临床检测：
a）空白对照出现扩增。如扩增曲线CT值大于25，需重复实验确证试剂污染。
b）阳性对照和阳性标准品均未检出，或阳性对照未检出而阳性标准品检出率大幅下降，表示试剂失效或检测灵敏度大幅下降。
4．5．3 阳性对照未检出，阳性标准品检测正常，提示样品提取液可能存在问题。重复新旧提取液阳性对照实验，确定提取液失效问题。更换提取液后该批试剂方可使用。
4．5．4 空白对照无扩增，阴性对照有扩增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可能。单独用提取液点样上机，出现扩增，需更换提取液后方可使用该批试剂。
4．5．5 阳性对照检出，阳性标准品未检出或扩增曲线明显系统性CT值偏大5个循环以上。提示阳性标准品存在问题。更换阳性标准品后该批试剂方可投入使用。
4．5．6空白对照、阴性对照无扩增，阳性对照正常检出，阳性标准品导出的标准曲线之斜率（－2.9～－3.9）、截距（26～34）、相关性（﹤－0.99）均在使用范围内，表明该批试剂良好，可以投入
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审核者:XXX 批准者:XXX 文件编号:PCR(N)-SOP-007 版本/修订号: A/0 实施日期: 2012年5月1日