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烯效唑（S-3307）浸种对小麦幼苗的影响
摘 要：本实验以“川育20”小麦为材料，研究不同浓度（0mg/L、10mg/L、20mg/L和40mg/L）的烯效唑浸种对小麦的形态指标和生理指标的影响。结果表明，烯效唑能促进根系和叶片的生长，促进植株矮化，增加叶绿素的含量，提高植物抗性，40mg/L浓度的烯效唑最适宜小麦生长。
关键词：烯效唑；生理指标；形态指标；幼苗素质
前言：烯效唑，化学名称为(E)-1-对氯苯基-2-(1, 2, 4-三唑-1-基)-4, 4-二甲基-1-戊烯-3-醇（C15H18ClN3O）。烯效唑有很广泛的生理作用，具有促进分蘖、矮化植株, 防止倒伏和控长壮秆, 抗逆, 防衰老的作用【1】，是一种生长延缓剂，能增加植物抗性，用于小麦时，可控制其营养生长，抑制细胞伸长，缩短节间，促进侧芽生长，促进茎、叶、根生长，打破顶端优势，防止衰老。本文主要目的是研究烯效唑对小麦幼苗形态和生理如株高、根长、根系活力、叶绿素含量等方面的影响。 1.材料与方法
1.1供试材料：小麦：川育20，由四川农业大学植物生理学实验室提供。 1.2种子处理
1.2.1表面消毒：将种子放在0.1%升汞中浸泡消毒10分钟，然后用清水冲洗4~5遍。
1.2.2浸种24h：分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L和40mg/L的S-3307浸泡种子24h，在用清水冲洗干净。
1.2.3催芽：将种子放在25℃的恒温箱中催芽3~5天。 1.2.4幼苗移栽：两个人一组，每人一杯200ml的培养基，以一杯30株的数量将小麦幼苗移栽至培养基中，再将培养基放置在生长室中培养两周以便实验使用。 1.3根系活力的测定（TTC法）【2】
1.3.1发芽种子根系活力的测定：取1.5cm长的根尖40条，置于盛有2mlTTC和2ml磷酸缓冲液的小玻璃瓶中，在37℃条件下保温1h。取出根尖后吸干根尖表面的水分，加入5ml乙酸乙酯一起在研钵中研磨，把红色提取液移入试管，并用少量乙酸乙酯洗涤残渣2~3次，并移入试管，定容至10ml。以空白乙酸乙酯做参比，在分光光度计上测定485nm下的吸光度。
1.3.2标准曲线制作（全班共用一个）：取1mg/L的TTC于50mL容量瓶中，加一勺保险粉和乙酸乙酯后剧烈震荡，使TTC充分还原为红色的TPF并溶与乙酸乙酯，然后用乙酸乙酯定容到容量瓶刻度线。此时溶液中TPF的浓度为20ug/ml。将上述TPF溶液稀释成系列浓度，取10mL容量瓶8个，分别编号，一次向各管加入TPF溶液0、2.00、4.00、8.00、10.00、12.00、12.00、14.00ug/ml，再加乙酸乙酯定容到10ml。以空白乙酸乙酯做参比在分光光度计上测定485nm下的吸光度，并绘制标准曲线。
1.4形态指标的测定
幼苗培养两周后，每个浓度分别随机选取10株幼苗，测定小麦平均苗高（基部至最长叶尖处）、叶片数、根长（测量最长的一条）、根数（从根基部数，避免数到侧根）、叶片及根的干重（先在105℃温度下杀青10~15min，再在80℃温度下烘干至恒重），并计算根冠比值（根干重：冠干重）。
1.5叶绿素含量的测定（分光光度法）【3】
取10株小麦幼苗擦净组织表面污物，每株小麦取第一片叶切下叶中段2cm，量出叶宽并计算叶面积，再放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉，研成均浆，过滤，滤液入25ml容量瓶，用80%丙酮反复洗涤残渣，滤纸至无绿色，合并滤液，定容。取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度，以80%丙酮为参比液。 1.6脯氨酸的测定（茚三酮比色法）【4】【5】
测定脯氨酸含量的方法通常用磺基水杨酸或酒精提取再与酸性茚三酮反应生成稳定的红色产物，然后于波长520 nm 处比色，通过标准曲线或回归方程计算脯氨酸的含量。
1.6.1脯氨酸的浸提：取小麦叶片20片剪碎混合，称取1.0g，加入少许石英砂和80%乙醇2ml左右在研钵中研磨成匀浆，将匀浆转入大试管，用乙醇洗涤研钵，乙醇总量15~20ml左右，摇匀，加塞，80℃水浴20min，同时，称一份样品，测定叶片含水量。
1.6.2脱色和去杂：向大试管加约0.25g活性炭和1g人造沸石，剧烈震荡5~6min，过滤或离心，滤液入25ml容量瓶，定容。 1.6.3显色反应：吸取3ml滤液加入试管，再加3ml冰醋酸、3ml
酸性茚三酮，加塞，置于沸水浴中，80%乙醇做空白对照。反应15min，将空白及样品从沸水中取出，在冷水中冷却。
1.6.4比色：以空白为参比液，在分光光度计上以515nm（或520nm）波长下测定样品反应液的光密度，根据光密度值从标准曲线上查出样品液的脯氨酸浓度。
1.6.5标准曲线的制作：用标准脯氨酸溶液配制成含脯氨酸0、2、4、8、12、16、20μg/ml的溶液。按上述相同方法，以脯氨酸浓度为横坐标，光密度为纵坐标绘制标准曲线。 1.7丙二醛含量的测定【6】
1.7.1MDA的提取：称取剪碎的试材1g，加入2ml10％TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在3000g下离心10min，上清液为样品提取液。
1.7.2显色反应和测定：吸取离心的上清液3ml（对照加3mlTCA），加入3ml 0.5%TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应10min，迅速冷却，若有沉淀应离心。取上清液测定532nm、600nm和430nm波长下的消光度。 2.结果与分析
2.1烯效唑浸种对小麦幼苗形态指标的影响
S3307根长 （mg/L） （cm） 0 6.22 10 11.18 20 9.36 40 14.16 根数 （条） 10 8 9 10 苗高 （cm） 15.81 10.67 11.27 10.58 叶片数（片） 2.36 2.33 2.44 2.53 根干重（g） 0.0843 0.0935 0.0903 0.104 苗干重 （g） 0.175 0.168 0.164 0.173 根冠比 0.490 0.552 0.553 0.603 根据表中数据可知：
烯效唑的使用使根长均有增加，在浓度为40mg/L时最长为14.16cm，