免疫学试题及规范标准答案(绝对精品) 联系客服

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高,使吞噬细胞易于从血管内游出;巨噬细胞趋化因子可招引相应的免疫细胞向抗原所在部位集中,以利于对抗原进行吞噬、杀伤、清除等。

五、论述题(共30分) 1、

试述双抗体夹心法检测血清中的乙肝表面抗原的原理及步骤?

一.原理

1.以特异性Ab(抗-HBSAg IgG 单克隆抗体)包被载体表面 2.然后加入可能含有相应Ag的待测血清,孵育后洗涤 3.再加酶标的特异性Ab一起孵育

4.包被的Ab待测Ag和酶标Ab形成夹心复合物

5.洗涤加底物,根据颜色的有无和颜色的深浅定性或定量检测Ag

用ELISA双抗体夹心法检测HBsAg,先将HBsAg多克隆抗体吸附到固相载体表面,然后加入待检血清样品,若样品中有HBsAg,则与HBsAg多克隆抗体在载体表面形成抗原-抗体复合物,再加入酶标记抗HBsAg单克隆抗体,形成固相HBsAg多克隆抗体-HBsAg-酶标记抗HBsAg单克隆复合物,加入酶的底物显色,用肉眼观察或比色测定抗原量。

双抗原夹心法 -操作步骤: ⑴ 将特异性抗原包被固相载体。孵育一定时间,使

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形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原和杂质。 ⑵ 加待检标本,孵育,使标本中的抗体与固相载体上的抗原充分反应,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。 ⑶ 加酶标抗原,孵育,使形成固相抗原-待测抗体-酶标抗原夹心复合物。洗涤除去未结合酶标抗原。 ⑷ 加底物显色。固相上的酶催化底物产生有色产物,通过比色,测标本中抗体的量。 间接法间接法间接法间接法 此法是测定抗体最常用的方法,属非竞争结合试验。

基本原理是将抗原连接到固相载体上,样品中待测抗体与之结合成固相抗原-受检抗体复合物,再用酶标二抗(针对受检抗体的抗体,如羊抗人IgG抗体)与固相免疫复合物中的抗体结合,形成固相抗原固相抗原固相抗原固相抗原-受检抗体受检抗体受检抗体受检抗体-酶标二抗复合物酶标二抗复合物酶标二抗复合物酶标二抗复合物,测定加底物后的显色程度,确定待测抗体含量。 【操作步骤】

竞争法ELISA可用于抗原和半抗原的定量测定,也可对抗体进行检测

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2、

I型变态反应的发生机制及过程、反应特点? 答:Ⅰ型超敏反应的发生机制:

Ⅰ型超敏反应是由于变应原再次进入体内后引发的超敏反应,其发生通常分三个阶段: (1)致敏阶段

在此阶段,变应原进入机体,刺激机体特异的B淋巴细胞,使其增殖分化为浆细胞,浆细胞分泌产生针对特异变应原的IgE抗体,此抗体吸附于肥大细胞和嗜碱性粒细胞上,使机体处于致敏状态。 (2)发敏阶段

当有相同变应原再次进入机体时,与致敏靶细胞表面的IgE Fab段超变区特异性结合,触发靶细胞的细胞膜活化,使其脱颗粒及合成新的生物活性介质。 (3)效应阶段

颗粒中的生物活性介质及新合成的生物活性介质作用于相应的效应器官,引起效应器官病理改变。

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