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23谷氨酰胺合成酶的活性可被( )和( )共价修饰调节,这是存在于细菌中一种共价修饰调节酶活性的方式之一。

24判断一个纯化酶的方法优劣主要依据是酶的( )和( )。

25固定化酶的理化性质会发生变化,如Km( ),Vmax( )等。 二、是非题

1 与非酶反应相比,酶反应能使更多的底物变成为产物。( ) 2 酶影响它怕催化反应的平衡的到达时间。( )

3 辅基与辅酶的区别只在于它们与蛋白质结合的牢固程度不同,并无严格的界限。( ) 4 氧化酶都含有细胞色素。( )

5 酶反应最适pH只取决于酶蛋白本身结构。( )

6 在极低底物浓度时,酶促反应初速度与底物浓度成正比。( ) 7 做为辅因子的金属离子,一般并不参与酶活性中心的形成。( ) 8 底物与酶的活性中心靠共价键结合,以提高催化效率。( )

9 测定反应的最适温度时,先将酶在不同温度下保温一段时间,然后在30℃下测定酶活性。( )

10 Km值是酶的一种特征性常数,有的酶虽可以有几种底物,但其Km值都是固定不变的。 11 酶原激活作用是不可逆的。( )

12 某些酶的Km值可因某些结构上与底物相似的代谢物的存在而改变。( ) 13 反竞争性抑制剂不会改变酶的最大反应速度。( ) 14 丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。( )

15 用增加底物浓度的办法可以部分或全部解除酶的非竞争性抑制。( ) 16 酶反应中,底物类似物的抑制作用与过量底物抑制作用的机制基本上是相同的。( ) 17 核酶只能以RNA为底物进行催化反应。( ) 18 ATP是磷酸果糖激酶的底物,因而高ATP可以加快磷酸果糖激酶催化F-6-P生成F-1,6-2P的速度( )

19 蛋白质磷酸化和去磷酸化是可逆反应,但其可逆反应是由不同种酶催化完成的。( ) 20 限制性内切核酸酶是能识别数个(一般为4到6个)特定核苷酸序列的DNA水解酶。21磷酸化酶激酶从ATP中获得一份磷酸,而变得活化。( )

22 利用过渡态类似物为半抗原,免疫动物获得抗体,从抗体中筛选具有催化活性的免疫球蛋白,这是迄今为止获得抗体酶的唯一方法。( ) 23 负协同性不能用MWC(序变模型)理论解释。( )

24 别构调节物的存在能改变酶与底物的结合常数,但不改变酶的最大反应速度。( ) 25 别构酶作为多酶系统的调节酶常常位于系统的前面,催化限速反应。( ) 26 别构酶的特点之一是其催化活性受其构象变化的调节。( ) 27 所有别构酶都具有S形的动力学曲线。( ) 28 具有正协同效应的酶其Hill系数总是小于1的。( ) 29 同工酶往往具有相同的电泳迁移率。( )

30对于多酶体系,正调节物一般是别构酶的底物,负调节物一般是别构酶的直接产物或代谢序列的最终产物。( ) 三、选择题

1在测定酶活力是,用下列哪种方法处理酶和底物才合理( )

A 其中一种用缓冲液配制即可 B 分别用缓冲液配制,然后混合进行反应 C 先混合,然后保温进行反应

D 分别用缓冲液配制,再预保温两者,最后混合进行反应

2 假定一种酶只有当某一特定的组氨酸残基侧链未被质子化时,酶分子才具有活性,降低pH对于该酶会发生下列哪一种类型的抑制作用。( )

A 反竞争性 B 非竞争性 C 竞争性 D 混合型 3 酶的纯粹竞争性抑制具有下列哪种动力学效应( ) A Vmax不变,Km增大 B Vmax不变,Km减少 C Vmax增大,Km减小 D Vmax增大,Km不变 4 酶与底物分子间的关系可以恰当地表述成( )

A 一种临时性结合 B 通过共价键的一种稳定结合 C 酶在其中发生永久性改变的一种结合 D随机的非互补结合

5 已知胰凝乳蛋白酶的转换数是100s-1,DNA聚合酶是15s-1。下列说法正确的是( ) A 胰凝乳蛋白酶的底物结合常数高于DNA聚合酶

B 胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶反应速度更大

C 在一定的酶浓度和饱和底物水平下胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶在相同条件下更低

D 在饱和底物水平下,胰凝乳蛋白酶的反应速度大约是DNA聚合酶反应速度的6.7倍 6羧肽A催化底物水解的过程包括( ) A结构重排将必需氨基酸残基靠近敏感键 B 形成一个C端环肽的共价中间物

C 活性部位Tyr残基脱质子形成亲核作用

D 活性部位的结合的活化水被底物待裂解肽键的羰基氧置换 7 若某酶特性按照典型的米氏动力学公式,米氏常数值可以从反应速度对底物浓度所作的双倒数图形中的( )求得

A 曲线的拐点 B 曲线的斜率

C 曲线在x轴上的截距的绝对值 D曲线在x轴上的截距的绝对值的倒数 8 在胰凝乳蛋白酶催化期间Asp102和His57的作用是( ) A 中和其他侧链上的电荷 B 质子穿梭 C 保持疏水性口袋打开 D 夹紧底物进入活性部位

9天冬氨酸转氨甲酰磷酸合成酶(carbamoyl phosphate synthetase Ⅱ)是( ) A 别构酶 B 受GDP/GTP调节

C 单体酶 D 天冬氨酸生物合成途径的限速酶

10下列几种胃肠道酶多数是以无活性的酶原形式分泌出来的,例外的一种是( ) A 胰凝乳蛋白酶 B 胰蛋白酶 C核糖核酸酶 D 羧肽酶 11 羧肽酶含有的金属离子是( )

A 铁 B 镁 C 锌 D 铜

12 下列酶中属于丝氨酸为活性中心的蛋白水解酶是( ) A 木瓜蛋白酶 B 弹性蛋白酶 C 羧肽酶 D 菠萝蛋白酶

13 实验室合成多肽除了化学合成外,还可以利用酶催化进行酶促合成。目前酶促合成多肽所用的酶类是( )

A 蛋白水解酶 B 蛋白激酶 C 氨基转移酶 D 氨基酸-tRNA连接酶

14 TPCK(N-对甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲基酮)是下列哪个酶的亲和标记试剂( ) A 胰蛋白酶 B 胰凝乳蛋白酶 C 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 D 溶菌酶

15 二异丙基磷酰氟专一地不可逆抑制( )

A 丝氨酸蛋白酶 B 巯基蛋白酶 C 天冬氨酸蛋白酶 D 溶菌酶

16胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶的裂解专一性部分地依赖于( ) A 催化Ser接近专一性口袋

B 专一性口袋的大小、形状和电荷 C 氧阴离子与专一性口袋之间的距离 D 专一性口袋中存

17 在溶菌酶催化反应中,起稳定形变底物正碳离子的残基是( ) Aglu-35 Basp-52 C N端NH2 D C端COO- 18 端粒酶(telomerase)是属于( )

A限制性内切酶 B DNA聚合酶 C RNA聚合酶 D 肽酰转移酶 19 酶促反应降低反应活化能的能量来源是( ) A 底物化学链的断裂可释放的化学能 B底物形变能 C 酶与底物结合能 D 酶构象变化所释放的能量

20别构酶与不同浓度的底物发生作用,常呈S形曲线,这说明( ) A 别构酶是寡聚体 B 别构酶催化几个独立的反应并最后得到终产物 C 与单肽链的酶相比,别构酶催化反应的速度较慢

D 别构酶结合一个底物后,将促进与下一个底物的结合,并增强酶活力 四、问答及计算题

1何为酶的活力和比活力?测定酶活力时应注意什么?为什么测定酶活力时以测定初速度为宜,并且底物浓度远远大于酶浓度?

2已糖激酶溶液在45℃,12min内会丢失50%活性。但是当有大量底物葡萄糖存在时,该酶在45℃只丢失3%活性。试解释此现象。

3 甲醇对人体毒性很大,只要喝下30mL即可致死。甲醇的毒性不是由于其本身有毒而是其代谢产物甲醛。在肝脏醇脱氢酶作用下甲醇可以迅速氧化为甲醛。对于甲醇中毒者的医疗是给病人以乙醇,乙醇的给量在正常人身上可引起中毒反应,试解释这种处理为什么有效? 4将下列反应的抑制剂分类,如果是可逆的,则注明竞争性或非竞争性。 (1)琥珀酸 + FAD ? 延胡索酸+ FADH2;抑制剂:丙二酸 (2)次黄嘌呤 + O2 + H2O ?黄嘌呤;抑制剂:别嘌呤醇

(3)铅中毒引起低血色素小红细胞性贫血。它可抑制合成血红蛋白的酶,这种抑制类型是什么?

(4)乙酰胆碱 + H2O → 乙酸 + 胆碱;抑制剂:DFP

(5)某些细菌不能利用叶酸前体,而是通过把P-氨基苯甲酸(PABA)连到喋呤上,再加上谷氨酸来合成叶酸。磺胺可以抑制这种合成过程的酶,磺胺的抑制属于何种类型? 5 有一种蛋白水解酶作用于数种人工合成底物,为了比较这些不同的底物和酶的亲和力的差异,应该怎样来说明它?

6 什么是核酶(ribozyme)和抗体酶(abzyme)?它们和酶(enzyme)有什么不同?

7 decamethonium是一种用于肌肉松弛的药物,是乙酰胆碱酯酶的抑制剂,这种抑制作用可以通过增加乙酰胆碱的浓度来逆转或解除。请问这种药物是否与酶共价结合?属于哪种类型的抑制剂?并解释为什么可以通过增加乙酰胆碱的浓度来解除抑制?乙酰胆碱酯酶也可以被DFP失活,因为DFP可以与酶的Ser残基共价结合,但是decamethonium可以对酶起保护作用。在一定量的酶和DFP存在时,decamethonium可以使酶失活的速度降低,请解释。 8 (1)为什么某些肠道寄生虫如蛔虫在体内不会被消化道内的胃蛋白酶,胰蛋白酶消化?

(2)为什么蚕豆必需煮熟后食用,否则容易引起不适?

9甘油醛-3-磷酸脱氢酶,相对分子质量为4万,由4个相同亚基组成,每个亚基上有一个活性位点,在最适条件下,5ug纯酶制品每分钟可以催化2.8umol甘油醛-3-磷酸转化为甘油酸-3-磷酸。请计算酶的比活力和单个活性位点的转换数。

10α-糜蛋白酶(Mr 24 000)可以水解苯甲酰-L-酪氨酸乙酯。比活为45.0umol/min/mg酶。已知α-糜蛋白酶只有一个活性位点。求转换数。

11 (1)对于一个遵循米氏动力学的酶而言,当[S] = Km时,若υ= 35umol/min,Vmax是多少umol/min?

(2)当[S] = 2×10-5mol/L,υ= 40umol/min,这个酶的Km是多少?

(3)若I表示竞争性抑制剂,KI=4×10-5mol/L,当[S] =3×10-2mol/L和[I]= 3×10-5mol/L时,υ是多少?

12 在不同底物浓度的反应体系中,分别测有无抑制剂存在时的υ,数据如下:

-4

[S] 无I 有I(2.2×10mol/L)

-4

mol/L(×10) v(μmol/min) v(μmol/min) 1.0 28 17 1.5 36 23 2.0 43 29 5.0 65 50 7.5 74 61

求有无抑制剂存在时的Vmax和Km(Kˊm),并判断这种抑制剂是什么类型的抑制剂。 13 称取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液,从中取出0.1mL酶液,以酪蛋白为底物,用Folin-酚比色法测定酶活力,得各每小时产生1500ug酪氨酸。另取2mL酶液,用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。若以每分钟产生1ug酪氨酸的酶量为1个活力单位计算,根据以上数据,求出:(1)1mL酶液中所含蛋白质量及活力单位;(2)比活力;(3)1g酶制剂的总蛋白量及总活力。

14 神经毒气二异丙基氟磷酸(DFP)在一些酶中与丝氨酸的-OH反应生成HF和磷酰酯,1949年E.F.Jansen和同事们所作的化学酶修饰实验中,胰凝乳蛋白酶(Mr=25 000)首先在P标记的DFP中温育,然后用强酸将其水解。最后分离得到的氨基酸组分中每25 000g胰凝乳蛋白酶中有1mol标记的O-磷脂酰。从上述实验可以得到有关活性位点的氨基酸组成的什么信息?

15 乙醇脱氢酶催化各种醇氧化为相应的醛。如果底物浓度和酶量确定,下列底物的反应速率不同:甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、环已醇、苯酚。以反应速率降低的顺序将上述底物重新排列并解释排列的原因。

参 考 答 案

一、填充题

1酶蛋白 辅酶因子 酶蛋白 辅酶因子 2 凹穴 疏水 3 核酶(具有催化作用的RNA) 4酶的辅助因子 直接的激活剂 5 2 4 5 6 碱性氨基酸 碱性 7 n 小 8 远远超过酶浓度 最适温度 最适 初 9 酶的活力单位数 10 81 11 绝对 立体 12 –1/Km 1/Vmax 13 亚基解离

14 正碳离子 五价磷过渡态 Zn2+-活化水 四面体肽键 氧阴离子 活化水

15 无酶时不反应 被靶酶专一性激活 与靶酶反应必须比解离更为迅速,即K1>>Kdis 16 最慢的 第一步反应 17 酶活性中心 18 别构酶 共价调节酶 齐变 序变 19丝氨酸 20蛋白激酶 蛋白磷酸酯酶

21糖基化 乙酰化 γ-羧基化 ADP-核糖基化 22天冬氨酸 组氨酸